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发酵液蛋白提取 已有3人参与
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求助一种胞外蛋白提取试剂盒，或者发酵液中蛋白质的提取方法，十分感谢 发自小木虫IOS客户端 |
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时间戳又变了8-15
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3楼2016-01-14 16:52:26
【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2016-01-14 13:58:04
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心应助！ 2016-01-14 13:58:04
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1：你的表达系统是什么？ 2：发酵液中蛋白质的提取方法是 离心-上清0.22um滤膜过滤-后面收集的上清中加入100%TCA，4度沉淀4-8h，有时候也过夜，我有看过说-20度沉淀过夜的，我试过，液体冻起来了，感觉效果不是很好，沉淀完后10,000G离心30min，小心去掉上清，这时就能看到沉淀，再加入2ml丙酮洗一遍，晾干去除丙酮，再用一定体积的TE溶解（一般浓缩100倍，9ml上清到90ulTE）。 你参考我上面写的方法应该能跑出条带的，即使目的蛋白没表达，也会有菌体自身分泌的蛋白的，实验就是这样，反反复复，只要每次条件有点改变，不是简单的重复就好，结果总会出来的 |
2楼2016-01-14 10:37:06
hc-material
专家顾问 (职业作家)
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专家经验: +702 - 应助: 517 (博士)
- 金币: 467.7
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.9小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
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- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
4楼2016-01-18 11:23:51
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nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 注册商家也只能在广告区发广告，其它区发广告仍属违规 2016-05-05 22:14:35
nono2009: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档, 注册商家也只能在广告区发广告，其它区发广告仍属违规 2016-05-05 22:14:35
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5楼2016-02-15 11:30:57
