应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒单酶切，通过电泳能否知道酶切是否充分
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 4979  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒单酶切，通过电泳能否知道酶切是否充分 已有3人参与

我用EcoRV酶切pCDNA3.1/V5-HisB,我想知道酶切的是否充分，还请各位大神不吝赐教，谢谢啦
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-12-28 16:57:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
8楼: Originally posted by szlylk0105 at 2015-12-31 10:26:32
质粒有3种存在形态，环形、半环、线形。而这三种形态的质粒在琼脂糖凝胶电泳中的运动速度不一样，为环形>半环>线形。所以线性化后的质粒要比之前跑的慢，也就是分子量大。

“所以线性化后的质粒要比之前跑的慢，也就是分子量大”，这句话不对，无论是你说的环形，半环，线形质粒DNA（你这里的术语也不专业），它们的分子量是一样大，因为碱基数还是一样，不同的是cccDNA, ocDNA, linear DNA它们的空间构象不一样，所以共价闭合环状DNA的泳动速度大于线性DNA大于开环DNA，开环DNA跑得最慢
赞一下(1人) 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2015-12-31 10:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tianyufeiyu: 金币+3 2016-01-14 16:22:04
tianyufeiyu: 金币+2 2016-01-14 16:24:55
线性质粒一般要比超螺旋质粒跑得慢，如果酶切后电泳只有一条带就应该是酶切充分了，跑得时间要长一点，最好加个未酶切的作对照。
赞一下 回复此楼
生物科学
2楼2015-12-28 19:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-28 19:27:59
线性质粒一般要比超螺旋质粒跑得慢，如果酶切后电泳只有一条带就应该是酶切充分了，跑得时间要长一点，最好加个未酶切的作对照。

也就是说电泳是可以看到酶切的效果，请问你还知不知道有其他的方法
赞一下 回复此楼
3楼2015-12-29 11:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

科学小覃

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tianyufeiyu at 2015-12-29 11:06:00
也就是说电泳是可以看到酶切的效果，请问你还知不知道有其他的方法...

做一个转化，线性质粒一般转不进细菌里，若正常转化一个转化子都没有，则酶切基本完全。
赞一下 回复此楼
生物科学
4楼2015-12-29 21:24:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械专硕274求调剂，不挑专业学校 +4 泛泛2333 2026-04-05 5/250 2026-04-05 17:13 by lbsjt
[考研] 生物学308分求调剂（一志愿华东师大） +8 相信必会光芒万� 2026-04-05 10/500 2026-04-05 12:19 by Hdyxbekcb
[考研] 男生，一志愿沪9生物学071000，初试308求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:26 by barlinike
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 26考研调剂0710 0860 +9 补补不补 2026-04-03 14/700 2026-04-04 23:32 by 果冻大王
[考研] 调剂 +11 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 11/550 2026-04-04 22:21 by hemengdong
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 372分材料与化工（085600）一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 289-求调剂 +4 这里是_ 2026-04-03 4/200 2026-04-03 14:23 by 1753564080
[考研] 初试成绩337找调剂 +3 ??? ?. ? 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:43 by 土木硕士招生
[考研] 材料调剂 +4 一样YWY 2026-04-03 4/200 2026-04-03 09:48 by 蓝云思雨
[考研] 085600，320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 考研调剂 +3 李木子0120 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:45 by dongzh2009
[考研] 285求调剂 +14 AZMK 2026-04-02 14/700 2026-04-02 15:54 by 上九天揽月（好�
[考研] 354求调剂 +4 lxb598 2026-03-31 5/250 2026-04-02 09:55 by Jaylen.
[考研] 省双一流重点一本大学招收调剂 +4 wwwwffffff 2026-03-31 7/350 2026-04-01 15:23 by wwwwffffff
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭