24小时热门版块排行榜    

查看: 2104  |  回复: 9

xiaomogu123

新虫 (初入文坛)

[交流] 重叠PCR有杂带 已有6人参与

做两个小片段的重叠PCR。两个小片段都没有杂带,重叠后出现杂带,重复过还是一样的结果。两个小片段大小都是180左右,退火温度设的52度。求指点,谢谢!

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siriusxuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有杂带又怎么了?跑胶分离出预期条带,然后克隆出来鉴定不就行了?
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
2楼2015-12-27 23:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王者归来001

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用一个Touch-down的程序,把退火温度调高些试试。
坚持不懈,终会成功!
3楼2015-12-28 13:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomogu123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by siriusxuan at 2015-12-27 23:45:01
有杂带又怎么了?跑胶分离出预期条带,然后克隆出来鉴定不就行了?

胶回收的话浓度太低,没法酶切。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-12-29 08:48:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaomogu123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 王者归来001 at 2015-12-28 13:26:53
可以用一个Touch-down的程序,把退火温度调高些试试。

谢谢!

发自小木虫Android客户端
5楼2015-12-29 08:49:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

siriusxuan

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaomogu123 at 2015-12-29 08:48:41
胶回收的话浓度太低,没法酶切。
...

TA克隆然后扩增T载体,浓度有多低?2ng都没有???
此座可言轻社稷,江山万里起风尘。
6楼2015-12-29 08:53:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeast140208

新虫 (初入文坛)

退火温度太低
7楼2015-12-29 13:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huxi_8

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引物退火温度太低,肯定会有非特异扩增。

发自小木虫Android客户端
huxi
8楼2015-12-29 16:23:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

纳米之心

木虫 (文坛精英)

祝福楼主
火星人要回火星了!!!
9楼2015-12-29 16:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zzhjiangnan

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
直接酶切连接转化,挑出阳性转化子即可
10楼2015-12-29 20:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xiaomogu123 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +4 myrtle 2026-08-26 4/200 2026-08-31 08:43 by 逸域隐帆
[基金申请] 能否申诉? +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 08:28 by xiangy672
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 某些机构,以效率低为荣,以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见