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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 农林综合 » SOD活性测定的问题
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LIVESOCCER

金虫 (正式写手)

[求助] SOD活性测定的问题

我最近测叶片里面SOD活性。SOD活性，之前做的不少，但是这次非常奇怪，照光后样品管子比对照管子还要蓝。光照强度也都是均一的，我用对照管在各个位置都试过。因此，我怀疑是提取液的问题，可能加入能与NBT显色的物质，提取液是磷酸缓冲液加了1mMEDTA，0.25%triton（吐温）和2%的PVP，我查了查这三个试剂与NBT都不反应啊！
  真是第一次遇到这种情况，也很想不通，最多样品管活性低的话也就和对照管颜色差不多，但是样品管颜色还深！我真想不通了，不可能是样品本身含有干扰物质啊！
大家帮我分析分析吧！
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1楼 2015-12-09 12:26:38
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单音节的秋

新虫 (初入文坛)
★
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我是用邻苯三酚自氧化法，和你一样，加入酶提取液不但没有抑制，反而促进反应。求楼主得到答案后告知，跪谢！
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2楼2015-12-21 20:22:33
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macjr

银虫 (正式写手)
★
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试剂（酶）        用量/ml        终浓度/比色时
0.05mol/L磷酸缓冲液        1.5       
130mmol/L Met溶液        0.3        13mmol/L
750μmol/L NBT溶液        0.3        75μmol/L
100μmol/L EDTA-Na2液        0.3        10μmol/L
20μmol/L核黄素        0.3        2.0μmol/L
酶液        0.05        2支对照管以缓冲液代替酶液
蒸馏水        0.25       
总体积        3.0       
我做的是用这个方法
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3楼2015-12-27 08:55:51
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董玉锋earth

新虫 (初入文坛)
★
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我前段时间也测SOD酶活性了，和楼主方法一样。也遇到上面的问题，我们初步怀疑是温度控制的问题。
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4楼2015-12-27 10:40:37
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pandezhuo

银虫 (著名写手)
★
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酶提取有问题，应该是酶失活了

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5楼2015-12-27 14:01:47
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rootcare

银虫 (正式写手)
★
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可适当增加些酶提取液；另外，光照时注意均匀，光照结束后，取出样品时因及时用黑色布盖上样品与对照。
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努力与坚持
6楼2016-01-04 10:58:10
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ninxia1

禁虫 (著名写手)
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7楼2016-04-15 00:16:04
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ninxia1

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
8楼2016-04-15 00:17:07
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