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hufan2441

铁虫 (小有名气)

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[求助] 做的质粒应该是6000bp。结果提质粒后跑胶只有3000bp左右已有3人参与

酶切后5500bp的载体和600bp的目的片段连接、转化、培养、提质粒后跑胶只有3000bp左右了，这应该是哪个方面出了问题呢？

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1楼 2015-11-26 21:48:35

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q120465872

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

9楼: Originally posted by hufan2441 at 2015-11-30 10:36:24
我们实验室其他人好像没这种情况，我最近的几次都出现了这种情况，是我提质粒的操作有什么问题吗？
...

这个状况其实并不影响你后续的实验，如果你能确定你实验过程没有问题。不放心可以酶切或者测序确定。
正常的质粒，浓度较高的情况下很容易看到三条带的，不需要过分纠结这个问题。
不过需要注意一点，提质粒过程中试剂盒说明书上有提醒的，裂解时间、不能剧烈摇晃。这些步骤有可能导致基因组污染

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