应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 多次pcr均无法获得大量的目的
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
351/4返回列表1234下一页
查看: 1633  |  回复: 34
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

李豆豆416

铁虫 (小有名气)

[交流] 多次pcr均无法获得大量的目的 已有20人参与

有一段基因序列，始终pcr不出来，模版没有问题，引物换了好几对，也做过梯度，可是条带很暗，无法纯化，这是什么原因？请大家赐教

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-11-17 15:58:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

铿锵爪神

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
顶～我也遇到了同样问题

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-11-17 16:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xushiqi001

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
换酶。你别的PCR有问题么。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-17 16:08:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李豆豆416

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xushiqi001 at 2015-11-17 16:08:56
换酶。你别的PCR有问题么。

酶换过了，用extaq，和lftaq都不行

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-17 16:20:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xushiqi001

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
看看引物是不是降解了，如果不是，适当增加循环数，调整退火温度。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-17 16:34:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

51mimi

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
先用低温（40度左右）做10个循环，然后用你预测的最适温度（也可梯度）再做25个循环，试试。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-11-17 16:43:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyfdgg

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你的模板是什么，如果是基因组DNA的话，一般冻融过几次就不能用了。如果是质粒的话要稀释一定的倍数。
还有你说的条带很暗是只有目的条带还是有杂带？
赞一下 回复此楼
7楼2015-11-18 10:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李豆豆416

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wyfdgg at 2015-11-18 10:27:10
你的模板是什么，如果是基因组DNA的话，一般冻融过几次就不能用了。如果是质粒的话要稀释一定的倍数。
还有你说的条带很暗是只有目的条带还是有杂带？

只有目的条带

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
8楼2015-11-18 10:36:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyfdgg

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 李豆豆416 at 2015-11-18 10:36:50
只有目的条带
...

模板是质粒还是？
赞一下 回复此楼
9楼2015-11-18 10:50:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wyfdgg

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 李豆豆416 at 2015-11-18 10:36:50
只有目的条带
...

如果是只有目的条带的话，说明你的模板量可能太少了。
赞一下 回复此楼
10楼2015-11-18 13:12:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 李豆豆416 的主题更新
351/4返回列表1234下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +6 PolarBear11 2026-03-26 6/300 2026-03-27 12:53 by lature00
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +7 minht 2026-03-26 7/350 2026-03-27 11:56 by zzll406
[考研] 0703化学338求调剂！ +6 Zuhui0306 2026-03-26 7/350 2026-03-27 10:35 by shangxh
[考研] 材料学硕，求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 284求调剂 +11 junqihahaha 2026-03-26 12/600 2026-03-27 04:37 by wxiongid
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 学硕274求调剂 +3 Li李鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 18:32 by 提出方法的提出�
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-26 6/300 2026-03-26 18:03 by 邱gl
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭