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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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济云帆

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA模板PCR弥散带 已有1人参与

现在用的是cDNA为模板，SRAP 的引物，扩增。做了好几天都没有条带。而是弥散条带。反转录用的RevertAid first strand cDNA synthesis kit. RNA检测没问题。A260/280 在2左右。
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1楼 2015-10-27 19:41:38
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Romaner007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-10-30 21:27:23
应该是引物，退火温度问题！可以适当的提高退火温度试试
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人的一切都应该是美丽的！
9楼2015-10-30 12:26:14
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兽医做科研

金虫 (小有名气)
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量
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2楼2015-10-27 20:37:59
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yangchun0
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量

1ul

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3楼2015-10-27 23:35:05
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济云帆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量

我一般是测了浓度，稀释成20ng/ul。原来能P出来的时候。大概浓度在100ng/20ul。

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4楼2015-10-28 06:32:36
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