应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
51/1返回列表
查看: 2590  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

runye2015

新虫 (小有名气)

[交流] 基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？ 已有6人参与

如题
1、两三个月前提取的基因组总DNA ，一直在零下80度冰箱保存
2、左1为12500 的MARKER，左2-3两样本是为3个月前提取的，4-5两样本是为2个月前提取
3、0.8%的琼脂糖，90V 5分钟，然后170V 25分钟
4、麻烦大家看下，我的DNA 有没有降解，尾带很亮，如果后续做PCR-DGGE还有荧光定量PCR还有会不会有影响？
谢谢大家啦！

基因组总DNA 电泳，这些尾带是降解的吗？
基因组总DNA 琼脂糖凝胶电泳
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-10-17 14:09:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

runye2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by tolobio at 2015-10-18 12:21:20
抽提的好的话，也是跑不出胶孔的。所以，胶孔有亮带，不一定是蛋白质残留。...

嗯嗯～谢谢您的回复！图里的那一部分提示降解呢～是最下面的尾带吗？～～

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-10-18 12:33:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

秉秉的法兰西

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+1 2015-10-17 22:52:22
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-17 17:32:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王平阳

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+5 2015-10-18 09:46:21
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秉秉的法兰西 at 2015-10-17 17:32:48
可能是引物特异性不高。或者引物时间长了

人家是直接基因组DNA电泳，没有做PCR，哪来的引物啊，麻烦回答问题前把问题看清楚先？

言归正传，提取总DNA，不可避免会带入RNA的，所以有可能是RNA，不过也有可能是DNA降解所致，我的经验是提取的DNA只要没有重大失误还是可以用的，做PCR的时候稀释一下，稀释到10到100 ng/uL使用效果会比较好，祝你好运！
赞一下(2人) 回复此楼
没有做不到，只有想不到！
3楼2015-10-17 20:28:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jianguochen

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
runye2015: 金币+4 2015-10-18 09:52:44
一般DNA降解弥散的话，跟你这个图不同，有可能跟楼上说的一样，有RNA污染，而且还降解了，光看你的胶图的话，看得出纯度是有问题的，胶孔里有亮带，应该是有蛋白残留，你是用什么方法提取的呢，有用分光光度计测下么，可以用RNase消化，然后纯化下。免得Qpcr时RNA引入非特异产物。
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-17 21:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +16 RichLi_ 2026-03-25 16/800 2026-03-26 16:18 by bruceku07
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 求调剂 +3 芦lty 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:25 by 芦lty
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪！？！
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭