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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急 在线等！！！ 基因组总dna有浓度，就是跑不出条带
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cai853

新虫 (初入文坛)

[交流] 急 在线等！！！ 基因组总dna有浓度，就是跑不出条带 已有11人参与

如题，做了好几次了，用NaroDrop测出来dna浓度800-1000，260/280=1.8-1.9,电泳试过好几次，就是没有条带。提的是鱼类肠道的基因组总dna，用手提的方法提取的，试剂盒也有试过。求大神指教！！！  万分感谢
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1楼 2015-10-30 11:03:50
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ufo29119690

金虫 (小有名气)
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loading buffer  加了么

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4楼2015-10-30 18:50:22
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总有二狗咬朕

银虫 (小有名气)
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2015-10-30 22:37:03
楼主看看电泳时mark有没有条带出来，如果没有就是胶的问题或者跑的时间过长跑没了，或者染料的问题，DNA分子量越大越容易结合染料，所以染料就多，而当分子量小的话，结合的就少，楼主是不是可以增加染料的浓度或染色时间试试呢。如果有就是样品的问题，楼主可以试试别人的胶跑跑看。
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我好累，承受这个年纪不该有的帅！
2楼2015-10-30 16:37:57
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cai853

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 总有二狗咬朕 at 2015-10-30 16:37:57
楼主看看电泳时mark有没有条带出来，如果没有就是胶的问题或者跑的时间过长跑没了，或者染料的问题，DNA分子量越大越容易结合染料，所以染料就多，而当分子量小的话，结合的就少，楼主是不是可以增加染料的浓度或染 ...

mark有条带，也许是我的样品有问题。但我不懂为什么还会有数值
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3楼2015-10-30 18:31:29
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cai853

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ufo29119690 at 2015-10-30 18:50:22
loading buffer  加了么

肯定加了
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5楼2015-10-30 18:56:00
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zinc650

铜虫 (小有名气)
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会不会你的样品降解了？

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6楼2015-10-30 19:09:51
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cai853

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zinc650 at 2015-10-30 19:09:51
会不会你的样品降解了？

DNA降解了，浓度还可以测出来吗？这个我不太清楚
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7楼2015-10-30 19:53:42
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lvsecaihong

铜虫 (小有名气)
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你模板稀释了吗？这么大浓度的DNA容易自身缠结，影响扩增效率。如果胶，加样什么没问题的话
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奋斗中的小虫
8楼2015-10-31 10:10:04
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yz2007433052

木虫 (职业作家)
★
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跑电泳的正负极接反了吧
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激浪青春！
9楼2015-10-31 17:19:15
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科学小覃

木虫 (正式写手)
★
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请问你电泳多长时间，marker最大多少？基因组一般都很大，时间不够可能还在上样孔里呢？
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生物科学
10楼2015-10-31 20:11:44
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