应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题！！！
51/1返回列表
查看: 6740  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

张小博

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题！！！ 已有12人参与

之前配制了考马斯亮蓝显色液，看各种文献说颜色变化应该是红棕色，显色液pH应为酸性，但是配制好的显色液颜色由红棕色变为深青蓝色，测的蛋白质含量也偏低，但是测了显色液的pH，的确在2左右，想问一下做过的大神们，配置好的显色液定容后的颜色是否为红棕色？？？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-08-27 14:28:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyibo373

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对的，我配G-250，加95%乙醇溶解，再加磷酸后，颜色是棕红色。此过程中尽量避光，并且稀释定容之前最好过滤一下，因为G-250可能会溶解不完全。
之后5倍稀释定容后的颜色是蓝色的，虽然文献中说的是棕红色，可我配过五六次了，还是蓝色的。配好的考马斯亮蓝要避光保存。1-3个月左右后应该显色就没有一开始那么好了。
个人建议配好的G-250不要立即5倍稀释定容，直接避光4度保存，用的时候好5倍稀释，用多少吸多少
赞一下(1人) 回复此楼
互相交流，互相学习，共同进步
7楼2015-08-27 20:33:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

biosep

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我记得 考马斯亮蓝有G-250和R-250两种，蛋白染色用的是G-250，看看你的正确否
赞一下 回复此楼
2楼2015-08-27 15:06:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosep

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
考马斯亮蓝有G-250和R-250两种。其中考马斯亮蓝G-250由于与蛋白质的结合反应十分迅速，常用来作为蛋白质含量的测定。考马斯亮蓝R-250与蛋白质反应虽然比较缓慢，但是可以被洗脱下去，所以可以用来对电泳条带染色。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-08-27 15:14:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

syhzlsd

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
G-250溶液配制后是青蓝色的，测浓度用G-250溶液要求配制精确，否则测出来不精确，对于新配制的G-250要用已知浓度的BSA做标准曲线，对比一下。另外，用G-250测浓度是受温度影响的，温度低时，测出的浓度会偏低，蛋白与考马斯亮蓝反应时间2min就够了。
赞一下 回复此楼
4楼2015-08-27 16:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 3/150 2026-11-09 14:58 by 天下第一剑
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭