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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题！！！
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张小博

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于考马斯亮蓝法测定蛋白含量的问题！！！ 已有12人参与

之前配制了考马斯亮蓝显色液，看各种文献说颜色变化应该是红棕色，显色液pH应为酸性，但是配制好的显色液颜色由红棕色变为深青蓝色，测的蛋白质含量也偏低，但是测了显色液的pH，的确在2左右，想问一下做过的大神们，配置好的显色液定容后的颜色是否为红棕色？？？
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1楼 2015-08-27 14:28:19
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张小博

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosep at 2015-08-27 15:06:10
我记得 考马斯亮蓝有G-250和R-250两种，蛋白染色用的是G-250，看看你的正确否

是G-250，显色液的颜色应该是什么呢
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5楼2015-08-27 16:54:18
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张小博

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by syhzlsd at 2015-08-27 16:17:59
G-250溶液配制后是青蓝色的，测浓度用G-250溶液要求配制精确，否则测出来不精确，对于新配制的G-250要用已知浓度的BSA做标准曲线，对比一下。另外，用G-250测浓度是受温度影响的，温度低时，测出的浓度会偏低，蛋白 ...

那文献上的红棕 色是没定容前的颜色，对么？
稀释到1升后是青蓝色？
还有在配制G-250溶液时，需要避光配制么？
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6楼2015-08-27 16:57:22
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张小博

新虫 (初入文坛)
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9楼: Originally posted by 安安刘轩儿 at 2015-08-31 16:03:23
考马斯亮蓝R250应该为蓝色，G250偏红棕色。

定容前还是定容后呢？
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11楼2015-09-01 10:54:08
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张小博

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 逍潇 at 2015-08-28 23:09:12
配好是红棕色

是稀释定容前的颜色么
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12楼2015-09-01 10:55:25
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