| 查看: 4372 | 回复: 5 | |||
[求助]
做 western blot 的 GAPDH 内参，总有杂带 已有2人参与
|
| 已经做了一个多月的 GAPDH 内参，总是有杂带，我用的是 bioworlde 品牌的一抗，说明书上建议的浓度是 1:5000—1:15000。我第一次做的时候是用 1:5000，结果是有明显的杂带，而且杂带和我要的条带矮得很近；第二次做是 1:7000，杂带明显且与所要条带距离很近；第三次，重新配置一抗，换了一组样，其他条件和前两次一样，条带表带效果不好，但是杂带没有了；从第四次开始，次次出现杂带，而且第四次我的样品和方法与第三次相同。我试了很多方法，比如说增加浓缩胶、加大封闭时间、用封闭液配置一抗，单仍然有杂带......求助各位大神，怎样才能解决，我今年研一刚结束，刚做了一年western，望帮助QAQ |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有182人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 做western时 电泳后胶特别软，还容易损坏
已经有13人回复
- 做western，曝光出来拖带问题
已经有2人回复
- 要做western blot的话应该用24孔板还是什么？
已经有13人回复
- anti-acetyl lysine做Western用什么封闭
已经有1人回复
- 关于新手做western blot
已经有13人回复
- 细胞提蛋白做western blot
已经有9人回复
- 做western blot显影用显影粉
已经有1人回复
- 175 KDa的大蛋白如何做 western blot
已经有2人回复
- 使用293T细胞做western blot，一般使用什么做内参？actin,还是？
已经有4人回复
- 未纯化血清抗体做western blot时，按多少比例稀释
已经有11人回复
- 如何用植物细胞做western blot
已经有3人回复
- 提膜受体蛋白做western，
已经有3人回复
- 经常做western，怎么自我保护啊
已经有20人回复
- 做western blotting用的抗体
已经有1人回复
haihang528
铁虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 219.4
- 帖子: 41
- 在线: 32.2小时
- 虫号: 2293897
- 注册: 2013-02-22
- 性别: GG
- 专业: 药物化学
2楼2015-08-25 23:54:39
3楼2015-08-26 13:46:29
fuyuandj86
版主 (著名写手)
己所不欲，勿施于人
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.015
- 金币: 7578.5
- 散金: 493
- 红花: 60
- 沙发: 2
- 帖子: 1313
- 在线: 1387.3小时
- 虫号: 544795
- 注册: 2008-04-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
- 管辖: 生物科学
4楼2015-08-27 09:01:07
5楼2015-08-27 15:25:20
6楼2016-12-20 15:59:22
