24小时热门版块排行榜    

查看: 4374  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

alsaith

新虫 (初入文坛)

[求助] 做 western blot 的 GAPDH 内参,总有杂带 已有2人参与

已经做了一个多月的 GAPDH 内参,总是有杂带,我用的是 bioworlde 品牌的一抗,说明书上建议的浓度是 1:5000—1:15000。我第一次做的时候是用 1:5000,结果是有明显的杂带,而且杂带和我要的条带矮得很近;第二次做是 1:7000,杂带明显且与所要条带距离很近;第三次,重新配置一抗,换了一组样,其他条件和前两次一样,条带表带效果不好,但是杂带没有了;从第四次开始,次次出现杂带,而且第四次我的样品和方法与第三次相同。我试了很多方法,比如说增加浓缩胶、加大封闭时间、用封闭液配置一抗,单仍然有杂带......求助各位大神,怎样才能解决,我今年研一刚结束,刚做了一年western,望帮助QAQ
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

堕落杨

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

亲,Bioworlde的一抗怎么样呢
大娘请开门,我们是红军
6楼2016-12-20 15:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

haihang528

铁虫 (初入文坛)

是下面有条浅浅的条带吗?如果是应该问题不大。。我的每次都有,而且和主条带的深浅趋势一致,恰好可以做个参考。。。
生物工程制药方向的有志青年。。
2楼2015-08-25 23:54:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alsaith

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by haihang528 at 2015-08-25 23:54:39
是下面有条浅浅的条带吗?如果是应该问题不大。。我的每次都有,而且和主条带的深浅趋势一致,恰好可以做个参考。。。

和主条带分不开,有重叠部分,而且关键是,它颜色也不浅QAQ,发愁ing

发自小木虫Android客户端
3楼2015-08-26 13:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
抗体特异性差什么招都没用。
换抗体吧,去隔壁的实验室问问他们的内参抗体是哪里买的
买已经和HRP偶联的GAPDH抗体,稍微好点,还省得用二抗。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-08-27 09:01:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +3 kongweilin 2026-03-26 3/150 2026-03-26 00:53 by 15723253818
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 275求调剂 +3 Micky11223 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:32 by barlinike
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:02 by 1294608413
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
信息提示
请填处理意见