| 查看: 414 | 回复: 1 | ||
[求助]
做western blotting用的抗体
|
|
做原核表达和western blotting用抗体 以检测转基因植物和表达分析 首先把目的基因的片段连在PET-32a中 我是从cDNA中扩增然后酶切PCR产物连接在载体上的 然后送到公司测序 送了4个克隆 结果发现4个克隆相差4-6个碱基 翻译成氨基酸以后也有小差别 但不是在基本结构域内 其中测序的有一个结果好一点 和转基因植株插入序列编码氨基酸差了一个 一个是A，一个是T 我不知道自己做抗体对载体序列的要求 有些许差异会导致严重后果吗 请大虾们赐教  |
回复此楼» 猜你喜欢
推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有80人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 问题请教-western blotting
已经有14人回复
- 求蛋白质相互作用研究方法...
已经有12人回复
- 【求助/交流】有关western blotting的求救
已经有9人回复
- western Blotting 的问题
已经有5人回复
apple6299
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 14797.2
- 散金: 10
- 红花: 1
- 帖子: 800
- 在线: 715.4小时
- 虫号: 675798
- 注册: 2008-12-16
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-10 16:20:48
lxjwishes(金币+3): 恩，荧光已经做了，现在就是想看看蛋白水平的，我的意思是大肠杆菌原核表达出来的蛋白氨基酸序列如果和转基因植物中的氨基酸有小差异会导致实验失败吗？ 2011-08-11 15:47:54
lxjwishes(金币+5): thanks 2011-08-15 21:56:48
lxjwishes(金币+2): 2011-09-13 16:05:13
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-10 16:20:48
lxjwishes(金币+3): 恩，荧光已经做了，现在就是想看看蛋白水平的，我的意思是大肠杆菌原核表达出来的蛋白氨基酸序列如果和转基因植物中的氨基酸有小差异会导致实验失败吗？ 2011-08-11 15:47:54
lxjwishes(金币+5): thanks 2011-08-15 21:56:48
lxjwishes(金币+2): 2011-09-13 16:05:13
|
碱基突变？对后续的表达会不会造成影响的，导致翻译的不准确。 检测基因表达的方法有两个，一个是在蛋白质水平上进行检测，即采用WB，你的是原核表达，加上载体pet上有his标签， 可以用his标签抗体啊 另一个方法是在mRNA水平上采用荧光定量PCR进行 |
2楼2011-08-10 16:08:38
30