应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物电泳图这样，求指点。。。
101/1返回列表
查看: 1418  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小小苏26

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR产物电泳图这样，求指点。。。 已有5人参与

求大神指点，香菇DNA PCR产物，跑出来这样，不知是哪个环节出了问题。本人菜鸟一枚，无人指点，全靠自己摸索，跪求！！！

PCR产物电泳图这样，求指点。。。
苏晨曦0.JPG
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-08-22 11:43:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半醒半梦

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-08-22 23:09:03
你拍的图片不清晰，虽然点了marker，但是电泳也没跑好。
目标条带这么大一团，根据经验是二聚体，目标条带可能没有P出来。
你预期的目标条带多大？
赞一下 回复此楼
只要想起一生中后悔的事，梅花便落满了南山。
2楼2015-08-22 14:33:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小苏26

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 半醒半梦 at 2015-08-22 14:33:52
你拍的图片不清晰，虽然点了marker，但是电泳也没跑好。
目标条带这么大一团，根据经验是二聚体，目标条带可能没有P出来。
你预期的目标条带多大？

750左右。
回复此楼
3楼2015-08-22 15:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

半醒半梦

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小小苏26 at 2015-08-22 15:40:58
750左右。...

那基本确定你没有P出目标条带。建议用高效率扩增酶，使用适当的模板量。
赞一下 回复此楼
只要想起一生中后悔的事，梅花便落满了南山。
4楼2015-08-22 16:57:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haloarchaeon

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小小苏26: 金币+2, ★★★★★最佳答案, 谢谢！ 2015-08-23 09:13:30
PCR做不出来，应该有很多原因：
首先，要确认有没有提到样品的总DNA。刚做，建议用相关试剂盒提取，避免走太多的弯路。
其次，你的引物序列是非正确？
再就是，PCR反应了。PCR退火温度与你的引物“退火温度 (Tm)”是否一致；水是否是双蒸水以上级别的；Taq酶、dNTP、buffer等配制是否合适，建议用公司卖的PCRmix，这个比较方便，只要加模板、引物、PCRmix、水就可以了，不容易出错。
赞一下(1人) 回复此楼
haloarchaeon
5楼2015-08-23 08:02:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉是你的模板问题，如果模板纯度浓度都好，片段也不是小片段的话，用别人用过的引物肯定能p出来的，试着重新提取DNA
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-08-23 09:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我是鱼豆腐

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

还有你跑电泳时把电泳仪啊之类要用的都好好洗一遍，你这成的像太模糊了，不知道是做的胶污染了还是镜头的问题，好好擦一擦呦
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-08-23 13:49:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云破月来xxz

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是没有P出来吧。感觉是引物二聚体，而且条带那么亮，很有可能是引物设计存在很大问题。
赞一下 回复此楼
做好自己
8楼2015-08-23 15:04:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanyu426980

新虫 (初入文坛)
首先拍胶请把加央孔放上面，还有marker是多大的，胶制作的时候EB不要加太多，背景略高，还有成像仪不是特别干净啊
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-08-24 11:31:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

发现微妙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你应该是用文献中的引物来P的吧，所以我感觉最主要的问题还在于模板的浓度和纯度。那比较亮的拖带因该是引物二聚体，但是亮度差异很大，可能移液枪操作不稳定。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2015-08-24 15:31:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小小苏26 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 6/300 2026-09-17 03:04 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 8/400 2026-09-17 02:52 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-17 02:26 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-17 01:16 by Tql5LQhh5rLK
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yaCh4X3wd045 2026-09-14 3/150 2026-09-16 20:39 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 16:00 by i3KBRD19ERkG
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-16 15:48 by i3KBRD19ERkG
[找工作] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-16 15:12 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭