| 查看: 1676 | 回复: 6 | ||
[求助]
双酶切及测序问题 已有2人参与
|
|
本人使用PETDuet-1双表达载体连入两个目的基因，两个基因已经连进去，其中一个经测序结果正确，另外一个上游选用BamH I酶切位点，下游选用SalI酶切位点，载体上BamHI在SalI酶切位点前面，但是连接后测序结果出现SalI在前而且目的基因序列反向互补。 本应该是 BamH I-目的基因-SalI，但现在是SalI-目的基因反向互补-BamHI这样的顺序连入载体，不知是何原因，求大神解答。 注：不是测序上下游问题，已经和载体序列比对过，真的是反向互补连进去的，且酶切位点不同也连进去了，载体序列之前也测序过，是正确的。 |
回复此楼» 猜你喜欢
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有294人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
-
分子量 1157 的 PROTAC 怎么配不析出：SGK3-PROTAC1 的溶解、分装与图谱复核
已经有0人回复
-
logP 6.1 的羧酸怎么配母液：GSK 650394 的溶解窗口与稀释顺序
已经有0人回复
-
从"水不溶"到 71 mg/mL：雷特格韦的 pH 依赖溶解与螯合色谱边界
已经有0人回复
-
133 Ų 的极性表面积，如何决定 TNG462 的母液配制与色谱条件
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于pET32a载体构建后，双酶切鉴定不正确~求助
已经有10人回复
- [转帖]PCR技术三十周年纪
已经有6人回复
- 基因工程菌的构建
已经有1人回复
- 基因克隆PCR检测不出阳性克隆
已经有1人回复
- 转录组研究前沿
已经有21人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
2楼2015-08-15 16:19:03
3楼2015-08-22 13:44:28
4楼2015-08-24 11:04:43
曼陀罗的祈祷
金虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1282.3
- 散金: 50
- 红花: 7
- 帖子: 494
- 在线: 187.2小时
- 虫号: 2660284
- 注册: 2013-09-13
- 性别: MM
- 专业: 水产学
5楼2015-09-07 15:01:29
6楼2015-09-09 10:48:12
曼陀罗的祈祷
金虫 (正式写手)
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 1282.3
- 散金: 50
- 红花: 7
- 帖子: 494
- 在线: 187.2小时
- 虫号: 2660284
- 注册: 2013-09-13
- 性别: MM
- 专业: 水产学
7楼2015-09-09 13:04:48
