| 查看: 1988 | 回复: 26 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
原核表达方面的问题，求各路大神不吝赐教 已有7人参与
|
||
|
最近在做原核表达，现在已经将目的基因与 pet28a连接好并转入了top10，测序正确后提取了质粒，下一步准备将质粒转入bl21。 问题就来了，每次做转化都不成功，板子上长满了克隆，可是挑12个没有一个是阳性的。::>_<:: 针对这个问题，我也分析了原因，1是感受态（我后来又用了同学的感受态，这批感受态他之前用过，没问题），2是板子的抗生素（我用这批板子做过其他实验，也没问题）3是质粒（我又把提出来的这个质粒送去了测序，也没问题）4实验操作（转化我做过很多次，而且这个转化实验我也重复了几次，每次都没阳性克隆） 问题就是这么个问题，请各路大神帮我分析分析，我第一次做原核表达。（额～本来想发金币表示感谢的，可是我穷，就三十个-_-||，所以。。。）请各路大神不吝赐教，先谢谢啦 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
xuejia174» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有53人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
等待晨曦
金虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1184.5
- 散金: 30
- 红花: 1
- 帖子: 194
- 在线: 87.3小时
- 虫号: 2304793
- 注册: 2013-02-27
- 性别: GG
- 专业: 兽医传染病学
20楼2015-07-28 18:09:49
wuwuqaz
木虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 1956.1
- 散金: 258
- 红花: 2
- 帖子: 792
- 在线: 97.9小时
- 虫号: 2545799
- 注册: 2013-07-14
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
2楼2015-07-25 11:12:21
3楼2015-07-25 11:17:11
great07225388
新虫 (著名写手)
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 1510.3
- 散金: 3964
- 红花: 10
- 帖子: 1069
- 在线: 198.7小时
- 虫号: 1049207
- 注册: 2010-06-29
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
4楼2015-07-25 12:19:49
