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xiaolu2114新虫 (初入文坛)
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求助,药动实验,空白血浆中杂质峰干扰药物测定。已有5人参与
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小弟最近家兔药动学实验,半个月预实验后,遇到了一个棘手的问题,尝试了各种方法依旧无法解决,请有经验的大神们指导指导。 主要问题是:血样测定中,血浆中一个杂质和药物的出峰时间一致,而且杂质峰面积较大,严重干扰血浆中药物浓度的测定。血样的处理方法为血浆液-液萃取后,氮气吹干,甲醇复溶。尝试了各种解决方法,依旧无果,1、改变流动相,最开始用甲醇-水的二元体系,内标和药物峰形都很好,进样空白血浆,发现一杂志峰保留时间和药物保留时间基本一致,然后尝试改变流动相比例,结果是不管怎么调,杂质的峰始终随药物的峰变动,没法分开。2、加入乙腈,采用三元体系,依旧没法把杂志和药物分开。(就感觉药物和杂质是同一个东西,不管怎么调,杂质的保留时间跟着药物保留时间步调一致的变化)3,改变提取方法,最先使用正己烷-乙醚(1:1)提取,而后改用正己烷-乙酸乙酯(1:1)提取,最后尝试先加和血浆等体积的1M NaOH,再用环己烷-异丙醇(96:4)提取,前面两种提取方法处理后的样品中杂质峰面积基本差不多,后一种方法感觉杂质峰有所减小,但内标和药物的提取回收率很低很低。噢,还有一点,预实验买了两只兔子,发现不同兔子取出来的血浆中干扰杂质的峰面积相差很大,一只大到完全覆盖药物峰面积,一只干扰杂质峰面约为药物定量限2——3倍。请大神们赐教 ![]() |
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xiaobudian_y
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xiaobudian_y
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