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xiaolu2114

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,药动实验,空白血浆中杂质峰干扰药物测定。 已有5人参与

小弟最近家兔药动学实验,半个月预实验后,遇到了一个棘手的问题,尝试了各种方法依旧无法解决,请有经验的大神们指导指导。
主要问题是:血样测定中,血浆中一个杂质和药物的出峰时间一致,而且杂质峰面积较大,严重干扰血浆中药物浓度的测定。血样的处理方法为血浆液-液萃取后,氮气吹干,甲醇复溶。尝试了各种解决方法,依旧无果,1、改变流动相,最开始用甲醇-水的二元体系,内标和药物峰形都很好,进样空白血浆,发现一杂志峰保留时间和药物保留时间基本一致,然后尝试改变流动相比例,结果是不管怎么调,杂质的峰始终随药物的峰变动,没法分开。2、加入乙腈,采用三元体系,依旧没法把杂志和药物分开。(就感觉药物和杂质是同一个东西,不管怎么调,杂质的保留时间跟着药物保留时间步调一致的变化)3,改变提取方法,最先使用正己烷-乙醚(1:1)提取,而后改用正己烷-乙酸乙酯(1:1)提取,最后尝试先加和血浆等体积的1M NaOH,再用环己烷-异丙醇(96:4)提取,前面两种提取方法处理后的样品中杂质峰面积基本差不多,后一种方法感觉杂质峰有所减小,但内标和药物的提取回收率很低很低。噢,还有一点,预实验买了两只兔子,发现不同兔子取出来的血浆中干扰杂质的峰面积相差很大,一只大到完全覆盖药物峰面积,一只干扰杂质峰面约为药物定量限2——3倍。请大神们赐教
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaolu2114: 金币+5, 有帮助 2015-07-20 10:01:50
这种情况难以完全分离,换不同品牌的柱子试,再不行就换其他的填料的柱子试,不一定要用家兔就换成其他动物。
6楼2015-07-20 02:26:49
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linda304

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2015-07-19 09:22:54
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change_clj

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaolu2114: 金币+3, 有帮助 2015-07-19 22:08:26
不知道你的峰位是如何分布的,血浆样品的杂质一般集中在5分钟以内吧,可以适当调整流动相比例,比如是反向色谱柱的话,水的比例增加可以延长出峰时间,可能就分开了,不行就试试梯度。
要不留遗憾的青春
3楼2015-07-19 12:56:35
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xiaolu2114

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by linda304 at 2015-07-19 09:22:54
试试大气压化学电离APCi,你们测定用的ESI吗

谢谢你的回复,我用的是紫外检测器,但我觉问题的重点是如何先把杂质和药物分开,而不是检测器的问题。你认为呢?
差一笔
4楼2015-07-19 22:02:04
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