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star97lx

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[交流] 关于western blot转膜，请教大神

小女子最近开始做western blot实验以求毕业，跑page显示的是有蛋白，但是转膜曝光之后一直没有条带，转膜后看得到marker，马上用丽春红染，也看不到蛋白，用考马斯亮蓝染剩下的胶，发现上面还剩下的是小分子蛋白。求助一下大神这是什么情况：为什么小分子的蛋白还留在胶上面？膜上一直检测不到蛋白？跪谢，不胜感激！！！！

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1楼2015-07-16 08:29:25

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star97lx

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引用回帖:

8楼: Originally posted by 凌波丽 at 2015-07-16 13:42:41
WB出现非特异性条带的原因与解决方法

凌波丽

2015年7月16日

1.抗体浓度过高；降低一抗、二抗的浓度，可以分梯度进行。

2.一抗的特异性不足；使用单克隆抗体，单克隆位点的抗原表位是唯一的，多克隆位点 ...

谢谢~确实需要学习的太多了~慢慢来~
再次感谢！