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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 测多酚氧化酶活性是背景颜色太深
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江小萍

银虫 (正式写手)

[求助] 测多酚氧化酶活性是背景颜色太深

测多酚氧化酶的抑制性，抑制剂是酸性试剂，但是底物（邻苯二酚）在酸性条件下显示并且颜色很深，所以在测od值的时候发现对照组颜色比实验组的颜色要深，怎么处理呢？
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1楼 2015-06-30 16:53:47
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江小萍

银虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 苏苏_22 at 2016-06-14 00:28:34
你好，我想问一个关于多酚氧化酶的问题，就是我测多酚氧化酶酶活时以邻苯二酚为底物，为什么吸光值开始是增大的，但大约在3分钟的时候逐渐又变小了是怎么回事，希望回答一下，谢谢啦！
...

我猜测是多酚氧化酶与邻苯二酚反应后期分解速率大于结合速率～

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9楼2016-06-14 08:49:41
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)
楼主，你好，你现在问题解决了吗？我现在也是测酶活抑制实验，而且抑制剂有颜色，测的吸光值更大了，有影响吗？还有楼主是怎么测的多酚氧化酶的活性呀，我不知道怎么设空白管了，就是觉得自己设计的有问题，所以想知道楼主是怎么设计的空白管呢？

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2楼2016-06-06 20:23:34
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江小萍

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 苏苏_22 at 2016-06-06 20:23:34
楼主，你好，你现在问题解决了吗？我现在也是测酶活抑制实验，而且抑制剂有颜色，测的吸光值更大了，有影响吗？还有楼主是怎么测的多酚氧化酶的活性呀，我不知道怎么设空白管了，就是觉得自己设计的有问题，所以想知 ...

我是用的酶标仪连续测了点，用这段时间内色差来计算酶活性，所以就没有设空白

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3楼2016-06-06 23:40:45
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苏苏_22

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 江小萍 at 2016-06-06 23:40:45
我是用的酶标仪连续测了点，用这段时间内色差来计算酶活性，所以就没有设空白
...

嗯嗯，谢啦！我之前设的空白是PBS和邻苯二酚的混合溶液，但是邻苯二酚自氧化，觉得好像也不能用来调零，所以不知道怎么设空白了，不过谢谢你！

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4楼2016-06-07 13:34:09
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