| 查看: 2075 | 回复: 9 | ||||
bw2318木虫 (小有名气)
|
[交流]
测定溶液中多肽含量变化的方法，不知道有没有不用标品的？
|
|
取 2. 5m l 样品溶液， 加入2.5ml 10%(W/V)的三氯乙酸(TCA)水溶液， 于漩涡混合仪上混合均匀， 静置 10min， 然后在 4000r/min 下离心15min， 将上清液全部转移到 50ml 容量瓶中， 并用 5%的 TCA 定容至刻度， 摇匀。 然后取 6.0ml 上述溶液置另一试管中， 加入双缩脲试剂 4.0ml(样液:双缩脲试剂=3:2， V/V)， 于漩涡混合仪上混合均匀， 静置 10min，2000r/min 离心 10min， 取上清液于 540nm 下测定 OD 值，对照标准曲线求得样品溶液中的多肽浓度 C(mg/ml)， 进而可求得样品中多肽含量。 标准曲线的制作取十个 10ml 的容量瓶， 用 5% 的 TCA 依次配制 0.0、0.2、 0.4、 0.6、 0.8、 1.0、 1.2、 1.4、 1.6 和 1.8mg/ml 的 Gly-Gly-Tyr-Arg 四肽标准溶液， 然后分别取 6.0ml标准溶液， 加入 4.0ml 双缩脲试剂，于漩涡混合仪上混合均匀， 静置 10min， 2000r/min 离心 10min， 取上清液于 540nm 下测定 OD 值(以第一管做空白对照)。 以肽的浓度为横坐标 X(mg/ml)， OD 值为纵坐标 Y，制作标准曲线(图 1)， 得到回归方程 y=0.3681x+0.0013， R2=1。 这是文献《蛋白水解液中多肽含量的测定方法》（食品科学）中的一个方法，里面会用到四肽标品，这种标品价格有点贵 我问了附近卖试剂的公司，100mg的价格定在1800元左右。所以感觉老板会有点意见，不知道虫友们，有没有做过这块的，有什么能替代的方法或标品价格比较低的渠道。请求指点。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 多肽合成技术交流 |
» 猜你喜欢
食品科学调剂交流
已经有0人回复
-
食品学硕362求调剂
已经有3人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有196人回复
-
一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业
已经有11人回复
-
食品调剂08考数学可调
已经有0人回复
-
食品工程调剂
已经有2人回复
-
一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200
已经有5人回复
-
广东海洋大学食品科学与工程、生物与医药招收调剂考生
已经有0人回复
-
欢迎调剂滁州学院生物与医药专硕
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 溶液中月桂酸含量的测定应该用什么方法？
已经有4人回复
- 想不通！原花青素含量的测定。。同样浓度的样品的吸光度大于标准品！（在线等）
已经有14人回复
- 酶解液中的多肽含量选择什么做标准曲线
已经有7人回复
- 求问液相做含量测定，两个标准品混标怎么配制
已经有9人回复
- 求问，测定某个成分的含量，如何配标准品浓度
已经有4人回复
- 新药含量测定方法学验证时，没有对照品，准确度该怎么做
已经有15人回复
- 在做含量测定方法方法学验证时，是用标准品还是用对照品？
已经有11人回复
- 乙醇、乙醚混合溶液中混有少量的水，如何测定水的含量，有没有比较简单的方法
已经有4人回复
- 羟脯氨酸的含量测定，急急急~
已经有15人回复
- 做一个多肽类药物 40度放样10天含量测定比室温放置含量高 为何？
已经有7人回复
- 测蛋白水解液中的多肽，你们都选择什么标准物质做标准曲线呢？
已经有37人回复
- 高效液相测定熊果酸和齐墩果酸的含量 做标准品时两个峰没有分开 求助 急 谢谢
已经有5人回复
- HPLC柱前衍生测定氨基酸含量标准品出现两个高度相关峰
已经有43人回复
- 怎么测定氨基氮的转化率?
已经有4人回复
- 化妆品中铅含量测定的研究方法
已经有8人回复
- 【求助】含量测定分析方法验证的可接受标准问题
已经有6人回复
- 【求助】多肽、氨基酸含量测定
已经有10人回复
- 【求助/交流】总黄酮含量测定中芦丁标准溶液的配置
已经有23人回复
- 【求助】求一常见溶液中碳酸钠含量的测定方法
已经有4人回复
huhyyong
木虫 (小有名气)
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 1525.8
- 红花: 8
- 帖子: 154
- 在线: 146.9小时
- 虫号: 1737832
- 注册: 2012-04-05
- 专业: 食品科学基础
2楼2015-07-01 16:06:59
bw2318
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2841.4
- 散金: 104
- 红花: 1
- 帖子: 164
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 2835904
- 注册: 2013-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
3楼2015-07-02 09:04:49
4楼2016-01-05 10:44:18
bw2318
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2841.4
- 散金: 104
- 红花: 1
- 帖子: 164
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 2835904
- 注册: 2013-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
5楼2016-01-05 12:58:02
6楼2016-01-05 13:27:57
bw2318
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2841.4
- 散金: 104
- 红花: 1
- 帖子: 164
- 在线: 75.5小时
- 虫号: 2835904
- 注册: 2013-11-29
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
7楼2016-01-05 14:39:36
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
你这个方法我用过的，可以的。 然后你想用不完标品的话，又想知道浓度，推荐用水解度这个指标，具体的计算方法可以看文献。 此外，单纯想知道多肽浓度大小，可以通过OD220来定性判断。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2016-01-16 23:32:21
9楼2016-01-26 09:35:38
李招9377
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 174.6
- 帖子: 66
- 在线: 56.7小时
- 虫号: 2396772
- 注册: 2013-04-02
- 性别: MM
- 专业: 水产生物研究的新技术和新
10楼2017-10-26 15:04:04
