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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 其他 » 想不通！原花青素含量的测定。。同样浓度的样品的吸光度大于标准品！（在线等）
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yuruj

金虫 (正式写手)

[求助] 想不通！原花青素含量的测定。。同样浓度的样品的吸光度大于标准品！（在线等） 已有4人参与

我现在在用香草醛—浓盐酸法测定原花青素的含量，取和标准品同样的浓度的样品，测出来的吸光度竟然大于标准品的浓度，但我做了香草醛空白，吸光度也不大啊，这是什么原因啊！！！（注：此样品是用正丁醇萃取的，我同时也做了用乙酸乙酯层萃取的样品，
我测的标准品A500nm=0.422
,正丁醇的样品A500nm=0.505
乙酸乙酯的样品A500nm=0.414，
正丁醇样品香草醛空白A500nm=0.0208，乙酸乙酯样品的香草醛空白A500nm=0.012）
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1楼 2014-09-03 09:27:38
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yuruj: 金币+2 2014-09-03 13:14:31
lz提取的花青素是个混合物，其中的主要成分和你拿来做标准品的物质不一样，相同浓度不同花青素可能对香草醛的反应值不一样。
另外可能就是溶剂的问题，我听实验室之前有人说，正丁醇会和香草醛反应。
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2楼2014-09-03 09:35:42
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普通回帖

yuruj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 09:35:42
lz提取的花青素是个混合物，其中的主要成分和你拿来做标准品的物质不一样，相同浓度不同花青素可能对香草醛的反应值不一样。
另外可能就是溶剂的问题，我听实验室之前有人说，正丁醇会和香草醛反应。

如果不同的原花青素和香草醛的反应值不一样，那大家怎么都会用这个方法来测呢？难道我要换标准品？还有一点，我的样品是冻干的，里面应该没有正丁醇吧
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3楼2014-09-03 10:16:32
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by yuruj at 2014-09-03 10:16:32
如果不同的原花青素和香草醛的反应值不一样，那大家怎么都会用这个方法来测呢？难道我要换标准品？还有一点，我的样品是冻干的，里面应该没有正丁醇吧...

不是要用标准品做标准曲线嘛，把样品浓度稀释到标准曲线的范围里，测定结果用 xx mg 标准品 equivalents/g 表示
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4楼2014-09-03 10:26:02
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yuruj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 10:26:02
不是要用标准品做标准曲线嘛，把样品浓度稀释到标准曲线的范围里，测定结果用 xx mg 标准品 equivalents/g 表示...

不用标准品做标准曲线，那我怎么测样品中原花青素的含量？
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5楼2014-09-03 10:36:59
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yuruj at 2014-09-03 10:36:59
不用标准品做标准曲线，那我怎么测样品中原花青素的含量？...

还没见过不做标准曲线的
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6楼2014-09-03 11:44:43
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yuruj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 11:44:43
还没见过不做标准曲线的...

呵呵，不好意思，开始没看清楚你的回复，我知道可以把样品稀释到标准曲线内，可是样品和标准品等浓度时，吸光度比标准品大，就说明存在问题，这样含量肯定是测不准的。。。
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7楼2014-09-03 13:14:09
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八米蔚蓝

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这种理化试验，大部分是和其中的一个什么基团产生的显色反映，测定的是一类物质，标准品当然纯度比较高，建议你做个液相看看，我以前做过总酚测定那一块。
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不是现在的大学配不上你，而是你配不上曾经那么努力的自己，和曾经奢侈的梦想。
8楼2014-09-04 14:06:02
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yuruj

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 八米蔚蓝 at 2014-09-04 14:06:02
这种理化试验，大部分是和其中的一个什么基团产生的显色反映，测定的是一类物质，标准品当然纯度比较高，建议你做个液相看看，我以前做过总酚测定那一块。

那你的意思是标准品不纯吗？话说我给标准品做了个液相，会变。。都伤心了，第一针纯度还行，后面再做就越来越差了，不知道什么原因，梯度和等度的情况还相差好多。。。
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9楼2014-09-04 20:57:54
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20092412962

至尊木虫 (著名写手)

木虫
晕  跟楼主遇到一样的问题  不知道怎么解决 而且测得值已经是标曲最大值的两倍多了  ········
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人生风景在游走
10楼2014-09-26 14:51:52
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