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yuruj

金虫 (正式写手)

[求助] 想不通!原花青素含量的测定。。同样浓度的样品的吸光度大于标准品!(在线等) 已有4人参与

我现在在用香草醛—浓盐酸法测定原花青素的含量,取和标准品同样的浓度的样品,测出来的吸光度竟然大于标准品的浓度,但我做了香草醛空白,吸光度也不大啊,这是什么原因啊!!!(注:此样品是用正丁醇萃取的,我同时也做了用乙酸乙酯层萃取的样品,
我测的标准品A500nm=0.422
,正丁醇的样品A500nm=0.505
乙酸乙酯的样品A500nm=0.414,
正丁醇样品香草醛空白A500nm=0.0208,乙酸乙酯样品的香草醛空白A500nm=0.012)
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yuruj: 金币+2 2014-09-03 13:14:31
lz提取的花青素是个混合物,其中的主要成分和你拿来做标准品的物质不一样,相同浓度不同花青素可能对香草醛的反应值不一样。
另外可能就是溶剂的问题,我听实验室之前有人说,正丁醇会和香草醛反应。
2楼2014-09-03 09:35:42
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普通回帖

yuruj

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 09:35:42
lz提取的花青素是个混合物,其中的主要成分和你拿来做标准品的物质不一样,相同浓度不同花青素可能对香草醛的反应值不一样。
另外可能就是溶剂的问题,我听实验室之前有人说,正丁醇会和香草醛反应。

如果不同的原花青素和香草醛的反应值不一样,那大家怎么都会用这个方法来测呢?难道我要换标准品?还有一点,我的样品是冻干的,里面应该没有正丁醇吧
3楼2014-09-03 10:16:32
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yuruj at 2014-09-03 10:16:32
如果不同的原花青素和香草醛的反应值不一样,那大家怎么都会用这个方法来测呢?难道我要换标准品?还有一点,我的样品是冻干的,里面应该没有正丁醇吧...

不是要用标准品做标准曲线嘛,把样品浓度稀释到标准曲线的范围里,测定结果用 xx mg 标准品 equivalents/g 表示
4楼2014-09-03 10:26:02
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yuruj

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 10:26:02
不是要用标准品做标准曲线嘛,把样品浓度稀释到标准曲线的范围里,测定结果用 xx mg 标准品 equivalents/g 表示...

不用标准品做标准曲线,那我怎么测样品中原花青素的含量?
5楼2014-09-03 10:36:59
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by yuruj at 2014-09-03 10:36:59
不用标准品做标准曲线,那我怎么测样品中原花青素的含量?...

还没见过不做标准曲线的
6楼2014-09-03 11:44:43
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yuruj

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小毛孩24 at 2014-09-03 11:44:43
还没见过不做标准曲线的...

呵呵,不好意思,开始没看清楚你的回复,我知道可以把样品稀释到标准曲线内,可是样品和标准品等浓度时,吸光度比标准品大,就说明存在问题,这样含量肯定是测不准的。。。
7楼2014-09-03 13:14:09
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八米蔚蓝

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种理化试验,大部分是和其中的一个什么基团产生的显色反映,测定的是一类物质,标准品当然纯度比较高,建议你做个液相看看,我以前做过总酚测定那一块。
不是现在的大学配不上你,而是你配不上曾经那么努力的自己,和曾经奢侈的梦想。
8楼2014-09-04 14:06:02
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yuruj

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 八米蔚蓝 at 2014-09-04 14:06:02
这种理化试验,大部分是和其中的一个什么基团产生的显色反映,测定的是一类物质,标准品当然纯度比较高,建议你做个液相看看,我以前做过总酚测定那一块。

那你的意思是标准品不纯吗?话说我给标准品做了个液相,会变。。都伤心了,第一针纯度还行,后面再做就越来越差了,不知道什么原因,梯度和等度的情况还相差好多。。。
9楼2014-09-04 20:57:54
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20092412962

至尊木虫 (著名写手)

木虫

晕  跟楼主遇到一样的问题  不知道怎么解决 而且测得值已经是标曲最大值的两倍多了  ········
人生风景在游走
10楼2014-09-26 14:51:52
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