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意萧02

木虫 (正式写手)

[求助] 求教关于水稻遗传转化过程中筛选问题 已有1人参与

大家好,我做遗传转化有一段时间了,水稻品种挑选的是日本晴,用日本晴种子诱导的愈伤,愈伤继代过程中都长的非常漂亮,但是在筛选时就出现问题了,农杆菌EHA105,侵染浓度一般在0.4-0.6之间,筛选过程中光照24小时,筛1长的正常,没有褐化(但是不光照时会褐化),但是14天后转到筛2的时候,过没几天,愈伤就开始发白,出现愈伤死亡的现象,我用的是1301载体,用潮霉素筛选。请问各位转化达人支招,你们是否有遇到过这样的问题?请问该怎么解决?
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dingyi3363

铜虫 (初入文坛)

玻璃化说明没有转进去
侵染完后不进行暗培养么
2楼2015-07-08 13:28:10
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咖比鱼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

亲,转筛选培养基也是暗培养,侵染转化的愈伤本应该褐化,能新长出亮黄色的愈伤,说明新长出的愈伤可能具有抗性
3楼2015-09-07 15:10:47
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