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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 重组大肠杆菌摇瓶不长，或摇碎死亡
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kitesuper

金虫 (初入文坛)

[求助] 重组大肠杆菌摇瓶不长，或摇碎死亡 已有3人参与

本人做重组大肠杆菌bl21（de3）摇瓶表达实验，前面四五个月做做好好的，最近把试管里活化的菌转到摇瓶里培养后，发现有的摇瓶里大肠杆菌摇瓶不长，有的开始长了但过一段时间好像都自溶碎掉死亡了。这是怎么回事，是菌种老化，还是噬菌体污染了？试管里的菌提过质粒，测过序都对。不知道问题出在哪里，求助！！！
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1楼 2015-06-09 10:56:49
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帷幕

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
镜检看看有没有杂菌，试管斜面扩大活化两批试试，同时做噬菌斑看看是不是噬菌体。
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2楼2015-06-10 10:34:39
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snoopytbw

荣誉版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
二个可能性，1 噬菌体污染 2 重组体系不适合该蛋白的表达，可能重组蛋白是水溶性的，过表达后也会引起细菌自溶
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3楼2015-06-11 10:10:17
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kitesuper

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 帷幕 at 2015-06-10 10:34:39
镜检看看有没有杂菌，试管斜面扩大活化两批试试，同时做噬菌斑看看是不是噬菌体。

镜检怎么做啊？
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4楼2015-06-11 18:32:54
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网速卡卡

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 帷幕 at 2015-06-10 10:34:39
镜检看看有没有杂菌，试管斜面扩大活化两批试试，同时做噬菌斑看看是不是噬菌体。

请问具体怎么做？

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5楼2015-10-20 00:50:25
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bugliuyun

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by snoopytbw at 2015-06-11 10:10:17
二个可能性，1 噬菌体污染 2 重组体系不适合该蛋白的表达，可能重组蛋白是水溶性的，过表达后也会引起细菌自溶

为什么水溶性蛋白的表达容易使菌体自溶呢？能给点解释吗？
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6楼2016-03-25 20:07:01
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liuxinyueer

木虫 (正式写手)
像噬菌体污染
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欢迎讨论，小木虫未能及时回复，请邮箱: lmzhang1994@gmail.com
7楼2020-04-13 13:45:59
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