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lixiaobai11

新虫 (小有名气)


[交流] 高效液相色谱(HPLC)基础问题

小虫初次研究高效液相色谱(HPLC)但是不知道柱温, 流速,及进样量是怎样影响到 峰宽,峰面积和保留时间的,请高手指教。
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old_yang

铁杆木虫 (著名写手)



lixiaobai11(金币+2): 谢谢参与
你配制几个样品(留着研究用),一次改变一个参数,例如柱温,20度,25度,30度,35度,40度等等,然后分别进样,再分析这些温度所对应的色谱峰;研究完温度,再改变流速,看看样品有没有变化?

大概就这样。
5楼2015-06-08 15:08:39
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)



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一般而言,柱温和流速的提高会使保留时间提前,样品峰宽变小。峰面积不太好说,可能变大也可能变小。
7楼2015-06-08 15:29:12
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yyy911019

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般等度洗脱柱温越高,保留时间将缩短,,一般将柱温设置为高于室温10℃。。流速的话,文献上见到的很多都是1ml/min,如果你做的峰型和分离度都很好的话,可以适当提高流速,你也可以对流速做一个单因素考察,以确定最佳流速。。进样量要看你的进样环是多大的吧,,一般是20微升。。
8楼2015-06-08 15:35:33
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黑小罗

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

9楼2015-06-08 16:43:49
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xichyangzh

银虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一般来说,提高温度,增加流速,出峰时间会提前,但是增加流速会导致系统压力增加,一般不推荐系统长时间再接近临界压力运行。进样量一般是由你用的系统的定量环决定的,一般都是10ul,20ul的比较多些。进样量太大,会导致仪器出现平头峰。
10楼2015-06-10 11:57:08
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
柱温增加及流速增加,峰宽变小,峰面积变小,保留时间减小;反之,峰面积增加,保留时间增加。
进样量比较好理解,进样量增加,峰宽变大,峰面积增加,保留时间基本不影响(可忽略其影响),峰对称性可能会降低;反之同理。
11楼2015-06-10 12:59:01
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dmbb2楼
2015-06-08 14:57   回复  
lixiaobai11(金币+2): 谢谢参与
2015-06-08 15:05   回复  
lixiaobai11(金币+2): 谢谢参与
qqllqq4楼
2015-06-08 15:07   回复  
lixiaobai11(金币+2): 谢谢参与
qqaoqq6楼
2015-06-08 15:16   回复  
lixiaobai11(金币+2): 谢谢参与
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