24小时热门版块排行榜    

查看: 876  |  回复: 7

wangjuan211

新虫 (小有名气)

[求助] cDNA的二倍体构建 已有3人参与

试验需要构建cDNA的二倍体,我的cDNA是粘性末端,可是连接了两次均不成功,我的连接体系如下:
cDNA                           4微升
T4 DNA连接酶              1微升
2*rapid ligase buffer     5微升    4度过夜
体系应该是没有什么问题,之前实验室有人连接过了,可是我总也成功不了,所以来这向各位大神求助了,是否有人做过这类试验...
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bryantchow

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nono2009: 金币-10, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 严禁回帖广告 2015-06-08 13:43:35
本帖内容被屏蔽

2楼2015-06-04 20:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
NEB上写着16°过夜
3楼2015-06-06 03:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by JNVBNC at 2015-06-06 03:34:17
NEB上写着16°过夜

我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜...
4楼2015-06-15 19:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-06-15 20:04:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-06-15 20:04:50
搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

这个实验室还真没做过...怎么做呢?
6楼2015-06-15 21:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 21:31:47
这个实验室还真没做过...怎么做呢?...

查下酵母双杂文库的制备就知道了

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-15 22:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 07:56:10
我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜......

哦 好吧 我用的是NEB的T4
8楼2015-06-16 02:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangjuan211 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +8 晴天加油 2026-08-26 9/450 2026-08-27 14:14 by gltch
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +6 苏东坡二世 2026-08-23 6/300 2026-08-27 13:57 by zhangjianl
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 明天应该可查了!? +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见