24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 772  |  回复: 7

wangjuan211

新虫 (小有名气)

[求助] cDNA的二倍体构建 已有3人参与

试验需要构建cDNA的二倍体,我的cDNA是粘性末端,可是连接了两次均不成功,我的连接体系如下:
cDNA                           4微升
T4 DNA连接酶              1微升
2*rapid ligase buffer     5微升    4度过夜
体系应该是没有什么问题,之前实验室有人连接过了,可是我总也成功不了,所以来这向各位大神求助了,是否有人做过这类试验...
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bryantchow

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nono2009: 金币-10, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 严禁回帖广告 2015-06-08 13:43:35
本帖内容被屏蔽

2楼2015-06-04 20:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
NEB上写着16°过夜
3楼2015-06-06 03:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by JNVBNC at 2015-06-06 03:34:17
NEB上写着16°过夜

我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜...
4楼2015-06-15 19:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-06-15 20:04:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-06-15 20:04:50
搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

这个实验室还真没做过...怎么做呢?
6楼2015-06-15 21:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 21:31:47
这个实验室还真没做过...怎么做呢?...

查下酵母双杂文库的制备就知道了

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-15 22:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 07:56:10
我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜......

哦 好吧 我用的是NEB的T4
8楼2015-06-16 02:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangjuan211 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +13 XX小邓 2026-03-29 14/700 2026-04-04 19:23 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 朔朔话 2026-04-02 7/350 2026-04-04 19:16 by 蓝云思雨
[考研] 化学357分,考研调剂 +4 .Starry. 2026-04-04 4/200 2026-04-04 18:59 by asdhh1991
[考研] 272求调剂 +4 松柏常青5 2026-04-03 4/200 2026-04-04 17:03 by babysonlkd
[考研] 本科211 分数293请求调剂 +3 莲菜就是藕吧 2026-04-01 3/150 2026-04-04 16:40 by 蓝云思雨
[考研] 本科211,293分请求调剂 +6 莲菜就是藕吧 2026-04-03 7/350 2026-04-04 11:12 by 莲菜就是藕吧
[考研] 26调剂 086003 +6 失活的细胞 2026-04-04 6/300 2026-04-04 09:50 by zhangdingwa
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[考研] 274求调剂 +9 顺理成张 2026-04-03 10/500 2026-04-03 15:10 by 啊俊!
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业(专硕)300分可以调剂去哪 +8 10160315 2026-04-02 8/400 2026-04-03 09:36 by hypershenger
[考研] 314求调剂 +11 1xiaojun23 2026-03-31 12/600 2026-04-02 12:31 by 1xiaojun23
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 085601材料工程找调剂 +20 oatmealR 2026-03-29 21/1050 2026-04-01 21:00 by lijunpoly
[考研] 284求调剂 +12 小熊~~ 2026-03-31 12/600 2026-04-01 20:23 by 花??
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +8 邱gl 2026-03-30 16/800 2026-04-01 17:58 by 邱gl
[考研] 080500-315分复试调剂 +9 上岸3821 2026-03-31 9/450 2026-03-31 17:29 by 唐沐儿
[考研] 0856 335分 +9 cccchenso 2026-03-29 9/450 2026-03-31 16:37 by lishahe
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
信息提示
请填处理意见