24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 766  |  回复: 7

wangjuan211

新虫 (小有名气)

[求助] cDNA的二倍体构建 已有3人参与

试验需要构建cDNA的二倍体,我的cDNA是粘性末端,可是连接了两次均不成功,我的连接体系如下:
cDNA                           4微升
T4 DNA连接酶              1微升
2*rapid ligase buffer     5微升    4度过夜
体系应该是没有什么问题,之前实验室有人连接过了,可是我总也成功不了,所以来这向各位大神求助了,是否有人做过这类试验...
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bryantchow

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
nono2009: 金币-10, 应助指数-1, 屏蔽内容, 违规存档, 严禁回帖广告 2015-06-08 13:43:35
本帖内容被屏蔽

2楼2015-06-04 20:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
NEB上写着16°过夜
3楼2015-06-06 03:34:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by JNVBNC at 2015-06-06 03:34:17
NEB上写着16°过夜

我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜...
4楼2015-06-15 19:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2015-06-15 20:04:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangjuan211

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2015-06-15 20:04:50
搞同源重组咯,定向克隆,效率挺高的

这个实验室还真没做过...怎么做呢?
6楼2015-06-15 21:31:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 21:31:47
这个实验室还真没做过...怎么做呢?...

查下酵母双杂文库的制备就知道了

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2015-06-15 22:11:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

JNVBNC

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangjuan211 at 2015-06-15 07:56:10
我用的promega的T4,上面写着粘性末端4度过夜......

哦 好吧 我用的是NEB的T4
8楼2015-06-16 02:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wangjuan211 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 353求调剂 +5 MayUxw1 2026-04-03 5/250 2026-04-03 21:17 by 啵啵啵0119
[考研] 321求调剂 +3 认真求上学 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:12 by 科研小专家
[考研] 293求调剂 +5 末未mm 2026-04-02 6/300 2026-04-03 15:20 by 王保杰33
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 085600专硕材料与化工348分求调剂 +10 上学啦! 2026-04-01 11/550 2026-04-03 14:13 by 百灵童888
[考研] 324求调剂 +12 想上学求调 2026-04-02 12/600 2026-04-03 11:15 by linyelide
[考研] 312 化工或制药调剂 +8 小小墨123 2026-04-02 9/450 2026-04-03 09:12 by zhouxiaoyu
[考研] 309分085801求调剂 +10 学员Gtwj7W 2026-03-31 10/500 2026-04-02 22:42 by yunlongyang
[考研] 085600,320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-04-02 3/150 2026-04-02 15:06 by cal0306
[考研] 初试301,代码085701环境工程,本硕一致,四六级已过,有二区一作,共发表5篇论文 +6 axibli 2026-04-01 6/300 2026-04-02 13:42 by Ecowxq666!
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 00:21 by 百秒光年
[考研] 265求调剂 +11 yelck 2026-04-01 12/600 2026-04-01 19:12 by 549790059
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-31 7/350 2026-04-01 14:50 by ZXlzxl0425
[考研] 262求调剂 +9 励志一定发文章 2026-03-31 10/500 2026-04-01 12:22 by sunshine0013
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 物理学调剂 +4 小羊36 2026-03-30 4/200 2026-03-31 16:16 by lishahe
[考研] 吉大生物学326分求调剂 +3 sunnyupup 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:28 by longlotian
信息提示
请填处理意见