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wuhaigang

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[求助] 荧光标记DNA的稳定性

我利用荧光FAM标记的DNA底物做碱基切除修复相关的酶活实验,基本原理如图片1所示底物DNA在酶A的作用下识别并切除错配碱基,接着在内切酶B的作用下将错配碱基后的DNA片段切除,这段被切除的DNA片段是带有荧光标记的,可检测到荧光变化。对照实验中DNA只加酶B时用新拿到的DNA做实验时结果发现基本上没有荧光变化,但是放了大约一个月后再做对照实验发现本不应该有荧光变化的反应也有了,如图2 所示。我想问一下是因为荧光标记的DNA不稳定导致的吗?如果是这样的话这种DNA应该怎么保存,大概可以稳定保存多久呢?谢谢大家多提供自己的想法及经验,本人刚开始做这方面的实验,一切都在探索阶段,希望能够得到大家的帮助,谢谢!

荧光标记DNA的稳定性
图片1.png


荧光标记DNA的稳定性-1
图片2.jpg
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