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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 荧光标记的单链DNA加热到90度荧光会发生改变吗？
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zxc123zxc

新虫 (小有名气)

[求助] 荧光标记的单链DNA加热到90度荧光会发生改变吗？

如题，高温影响荧光标记的单链DNA的荧光强度吗？
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1楼 2012-11-22 10:08:15
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zxc123zxc: 金币+10, 感谢回答！ 2012-11-22 15:19:00
crity328: 金币+1, 专家辛苦了，欢迎常来~ 2012-11-22 21:21:48
加热后，由于热运动加快，分子碰撞几率增大，导致荧光猝灭
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2楼2012-11-22 10:36:56
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流，欢迎常来~ 2012-11-22 21:22:03
zxc123zxc: 金币+10, ★★★很有帮助, 由于我是新手，好多操作方面的都不懂，谢谢你的回答哈！ 2012-11-23 10:12:03
应该不会的。做光谱分析时由于要让DNA变形后重新杂交然后进行扩增，这步操作基本上都是95摄氏度二分钟然后室温放置。至少在这个时间范围内荧光是不会出问题的。
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3楼2012-11-22 21:18:34
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新鲜晨曦

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zxc123zxc: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 回答得好详细啊，我这个提出问题的人思路有点不清楚，我指的就是后者，谢谢咯 2012-11-23 10:08:29
LZ的意思是在90℃下测荧光还是说加热到90℃再回复室温测荧光？
如果是后者的话，应该不会。我用FAM荧光团用之前都会加热到95℃再退火，没什么问题。
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4楼2012-11-23 09:16:47
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shixiaba

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by shixiaba at 2012-11-22 21:18:34
应该不会的。做光谱分析时由于要让DNA变形后重新杂交然后进行扩增，这步操作基本上都是95摄氏度二分钟然后室温放置。至少在这个时间范围内荧光是不会出问题的。

不客气，多多交流，相互学习。
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5楼2012-11-24 08:53:29
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hbhgzss

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chaijudi at 2012-11-22 10:36:56
加热后，由于热运动加快，分子碰撞几率增大，导致荧光猝灭

请问FAM 标记DNA 具体是标记在哪个位置上呢？或者是标记在碱基中哪个位点？请不吝赐教。
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过好今天，不让明天还如今天一样后悔昨天！
6楼2013-04-19 10:48:53
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chaijudi

至尊木虫 (著名写手)
应该是3“或5”端糖环的羟基上吧
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7楼2013-04-19 12:59:56
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