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酱油1991

铜虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌转化完感受态已有2人参与

麻烦问一下，农杆菌电击后出来的单菌落，摇菌的时候加多少的lb和抗生素，我的抗生素是利福平和卡那。之后做菌种检测对吗？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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没有不成功的人
1楼2015-05-23 12:43:35
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
酱油1991: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-05-24 09:26:36
阳性检测，不需要很多，1 mL足够了。进行后面的实验，鉴定阳性后，再扩大培养。至于抗生素浓度，你要看你们的母液是多大浓度，再查询你们的使用浓度。农杆菌培养基最好是用YEP。祝好
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-05-23 14:33:38
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erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我最近才做完这个，正好来回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡纳，如果你的农杆菌也是GV3101，用LB完全没问题，利福平和卡那霉素的工作液浓度和50ug/ml，至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃，250rpm过夜，第二天做菌液PCR验证就好了。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

酱油1991
3楼2015-05-23 22:29:11
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酱油1991

铜虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by erland21411 at 2015-05-23 22:29:11
我最近才做完这个，正好来回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡纳，如果你的农杆菌也是GV3101，用LB完全没问题，利福平和卡那霉素的工作液浓度和50ug/ml，至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃，25 ...

谢谢你

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没有不成功的人
4楼2015-05-23 23:32:00
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