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酱油1991

铜虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌转化完感受态 已有2人参与

麻烦问一下,农杆菌电击后出来的单菌落,摇菌的时候加多少的lb和抗生素,我的抗生素是利福平和卡那。之后做菌种检测对吗?

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没有不成功的人
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
酱油1991: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2015-05-24 09:26:36
阳性检测,不需要很多,1 mL足够了。进行后面的实验,鉴定阳性后,再扩大培养。至于抗生素浓度,你要看你们的母液是多大浓度,再查询你们的使用浓度。农杆菌培养基最好是用YEP。祝好
2楼2015-05-23 14:33:38
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erland21411

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近才做完这个,正好来回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡纳,如果你的农杆菌也是GV3101,用LB完全没问题,利福平和卡那霉素的工作液浓度和50ug/ml,至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃,250rpm过夜,第二天做菌液PCR验证就好了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2015-05-23 22:29:11
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酱油1991

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by erland21411 at 2015-05-23 22:29:11
我最近才做完这个,正好来回答~嘿嘿~
我的也是利福平和卡纳,如果你的农杆菌也是GV3101,用LB完全没问题,利福平和卡那霉素的工作液浓度和50ug/ml,至于加多少要看你自己母液配成多少的了。
挑菌之后之后28℃,25 ...

谢谢你

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没有不成功的人
4楼2015-05-23 23:32:00
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