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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 枯草芽孢杆菌表达系统和感受态制备
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

[交流] 枯草芽孢杆菌表达系统和感受态制备

做枯草表达系统的筒子们有没有遇到和我一样的问题？
原始菌在抗性平板上不生长，但一做成感受态就不行了，对照组和实验组长的差不多。
抗生素失效（抗生素为红霉素，难道在-20度下也会失效？）和操作污染的问题基本都排除了，感受态虽然做不好，但这种情况也真是折磨人。
关于制作方法，没有关于测OD值的，我想知道就培养那么几个小时的说法严禁吗？至今也找不到关于枯草168在对数末期的OD值。
大家多多交流啊
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1楼 2015-05-14 09:04:11
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匿名
本帖仅楼主可见
2楼2015-05-14 09:09:12
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hydzp
3楼2015-05-14 09:23:46
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
拒绝outsiders过来凑热闹，谢谢
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4楼2015-05-14 09:26:38
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yinrong1988

新虫 (初入文坛)
★
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4楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2015-05-14 09:26:38
拒绝outsiders过来凑热闹，谢谢

红霉素对枯草芽孢杆菌不敏感，你可以换一种抗性试试看
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5楼2015-05-15 11:19:06
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by yinrong1988 at 2015-05-15 11:19:06
红霉素对枯草芽孢杆菌不敏感，你可以换一种抗性试试看...

那为什么原始菌株不生长，但一做成感受态就不行了呢？
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6楼2015-05-15 11:42:48
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8wangle
7楼2015-05-15 11:53:45
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X小天T

金虫 (正式写手)
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6楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2015-05-15 11:42:48
那为什么原始菌株不生长，但一做成感受态就不行了呢？...

我也遇到这种问题了，不知道什么原因，但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中，形成了孢子，导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊，正在重做中。。。不知道LZ做出来没有
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8楼2015-07-09 10:42:15
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by X小天T at 2015-07-09 10:42:15
我也遇到这种问题了，不知道什么原因，但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中，形成了孢子，导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊，正在重做中。。。不知道LZ做出来没有...

我又从其他地方要来了一株菌，没有那么严重的问题了，而且抗生素也买得新的。你也可以从源头找找原因
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9楼2015-07-10 21:56:38
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眷1988

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by X小天T at 2015-07-09 10:42:15
我也遇到这种问题了，不知道什么原因，但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中，形成了孢子，导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊，正在重做中。。。不知道LZ做出来没有...

请问层主所用的枯草是哪一种呢 ，我转化的用的是WB800N,也是做出来的感受态会在抗性平板上生长，抗生素是没问题的，那就是菌落本身的问题。真是令人费解啊
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10楼2017-06-05 14:02:40
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