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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

[交流] 枯草芽孢杆菌表达系统和感受态制备

做枯草表达系统的筒子们有没有遇到和我一样的问题?
原始菌在抗性平板上不生长,但一做成感受态就不行了,对照组和实验组长的差不多。
抗生素失效(抗生素为红霉素,难道在-20度下也会失效?)和操作污染的问题基本都排除了,感受态虽然做不好,但这种情况也真是折磨人。
关于制作方法,没有关于测OD值的,我想知道就培养那么几个小时的说法严禁吗?至今也找不到关于枯草168在对数末期的OD值。
大家多多交流啊
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2楼2015-05-14 09:09:12
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3楼2015-05-14 09:23:46
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

拒绝outsiders过来凑热闹,谢谢
4楼2015-05-14 09:26:38
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yinrong1988

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2015-05-14 09:26:38
拒绝outsiders过来凑热闹,谢谢

红霉素对枯草芽孢杆菌不敏感,你可以换一种抗性试试看
5楼2015-05-15 11:19:06
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yinrong1988 at 2015-05-15 11:19:06
红霉素对枯草芽孢杆菌不敏感,你可以换一种抗性试试看...

那为什么原始菌株不生长,但一做成感受态就不行了呢?
6楼2015-05-15 11:42:48
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7楼2015-05-15 11:53:45
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X小天T

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 杨柳依依625 at 2015-05-15 11:42:48
那为什么原始菌株不生长,但一做成感受态就不行了呢?...

我也遇到这种问题了,不知道什么原因,但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中,形成了孢子,导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊,正在重做中。。。不知道LZ做出来没有
8楼2015-07-09 10:42:15
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杨柳依依625

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by X小天T at 2015-07-09 10:42:15
我也遇到这种问题了,不知道什么原因,但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中,形成了孢子,导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊,正在重做中。。。不知道LZ做出来没有...

我又从其他地方要来了一株菌,没有那么严重的问题了,而且抗生素也买得新的。你也可以从源头找找原因
9楼2015-07-10 21:56:38
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眷1988

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by X小天T at 2015-07-09 10:42:15
我也遇到这种问题了,不知道什么原因,但是我猜测可能是因为感受态制备的过程中,形成了孢子,导致对抗生素产生了抗性。。。纠结啊,正在重做中。。。不知道LZ做出来没有...

请问层主所用的枯草是哪一种呢 ,我转化的用的是WB800N,也是做出来的感受态会在抗性平板上生长,抗生素是没问题的,那就是菌落本身的问题。真是令人费解啊
10楼2017-06-05 14:02:40
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