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微生物发酵液粗提物HPLC分析波长选择 已有1人参与
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| 我要检测的物质是微生物发酵液萃取出来的物质，具体是什么物质现在也不知道，没有标准品，可以溶于甲醇，我进行了全波长扫描，最大吸收峰是249nm,但是还有很多不同波长下的峰值，所以不太确定怎么选择波长的事情，希望有人能指点一下。谢谢 |
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zhenwuhuang
至尊木虫 (文学泰斗)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
chin_jl: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2015-05-09 16:45:34
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| 先说色谱条件吧 乙酸根的检测波长是210nm ， 色谱条件1 Agilent SB-Aq C18 （250*4.6mm， 5um）， 25mM 磷酸二氢钾缓冲液（pH 2.5），流速：1.0mL/min， 柱温30度； 色谱条件2 C18 （250*4.6mm， 5um）， 25mM 磷酸二氢钾缓冲液（pH 2.5）：ACN=98:2，两者按比例混合均匀，单泵运行，流速：1.0mL/min， 柱温30度； 色谱条件3 Sepax Carbomix H-NP 10:8%， 4.6*300，流速0.6mL/min，柱温：55度，流动相：2.5mM硫酸。这三种方法反正都用来测过乙酸的。但是楼主的样品比较复杂，所以不好说，有离子交换柱最好，不行的话，C18也将就用吧，另外如果能用离子色谱来做应该也可以，这个时候估计要用离子排斥柱了。祝好哈~ |
2楼2015-05-09 16:38:33
3楼2015-05-09 16:45:22
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