应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体表达
81/1返回列表
查看: 1078  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

惊叹号

金虫 (正式写手)

[求助] 载体表达 已有4人参与

构建载体时，怎么判断目的基因和EGFP表达的是融合蛋白还是独立表达？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-05-07 10:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:17
本帖内容被屏蔽
2楼2015-05-07 10:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-07 10:27:48
跑电泳检测分子量？荧光检测？

我是需要在构建之前判断它的融合的还是独立的，怎么判断？
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-07 10:45:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:25
EGFP一般是在多克隆位点的前面或后面，主要是通过荧光来判断目的基因的表达。肯定是融合蛋白。如果你担心EGFP对试验有影响可以自己设计终止子，不让它表达或者在EGFP和目标蛋白之间设计LINKER。
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-07 15:32:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:33
在多克隆位点和EGFP之间，看看载体上是否有另一个启动子，如果有就一定是独立的共表达，如果没有，则可以进行融合表达。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-07 16:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:40
看是一个ORF还是两个ORF。
赞一下 回复此楼
6楼2015-05-07 16:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
我选择的载体MCS在EGFP前面，表达的是一个融合蛋白，现在的问题是融合蛋白的话，EGFP会不会影响目的基因的折叠？
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-07 17:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglele87

金虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-07 23:01:18
没移码的话理论上就是一起表达了啊。不过有时候可能目的蛋白不好表达或者表达后不稳定，western只能看到egfp。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
一生不羁放纵爱自由
8楼2015-05-07 18:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 惊叹号 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[考研] 292求调剂 +6 yhk_819 2026-02-28 6/300 2026-03-01 23:23 by 向上的胖东
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭