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惊叹号

金虫 (正式写手)

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[求助] 载体表达已有4人参与

构建载体时，怎么判断目的基因和EGFP表达的是融合蛋白还是独立表达？

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1楼 2015-05-07 10:20:19

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wanglele87

金虫 (著名写手)

应助: 10 (幼儿园)
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-07 23:01:18

没移码的话理论上就是一起表达了啊。不过有时候可能目的蛋白不好表达或者表达后不稳定，western只能看到egfp。

[ 发自小木虫客户端 ]

一生不羁放纵爱自由

8楼2015-05-07 18:15:46

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查看全部 8 个回答

nemo88

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:17

本帖内容被屏蔽

2楼2015-05-07 10:27:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 476.8
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专业: 临床生物化学检验

引用回帖:

2楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-07 10:27:48
跑电泳检测分子量？荧光检测？

我是需要在构建之前判断它的融合的还是独立的，怎么判断？

3楼2015-05-07 10:45:44

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caihang

铜虫 (小有名气)

应助: 34 (小学生)
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专业: 兽医传染病学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:25

EGFP一般是在多克隆位点的前面或后面，主要是通过荧光来判断目的基因的表达。肯定是融合蛋白。如果你担心EGFP对试验有影响可以自己设计终止子，不让它表达或者在EGFP和目标蛋白之间设计LINKER。

4楼2015-05-07 15:32:44

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 8 个回答

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