应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体表达
81/1返回列表
查看: 1083  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

惊叹号

金虫 (正式写手)

[求助] 载体表达 已有4人参与

构建载体时，怎么判断目的基因和EGFP表达的是融合蛋白还是独立表达？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-05-07 10:20:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nemo88

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:17
本帖内容被屏蔽
2楼2015-05-07 10:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nemo88 at 2015-05-07 10:27:48
跑电泳检测分子量？荧光检测？

我是需要在构建之前判断它的融合的还是独立的，怎么判断？
赞一下 回复此楼
3楼2015-05-07 10:45:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caihang

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:25
EGFP一般是在多克隆位点的前面或后面，主要是通过荧光来判断目的基因的表达。肯定是融合蛋白。如果你担心EGFP对试验有影响可以自己设计终止子，不让它表达或者在EGFP和目标蛋白之间设计LINKER。
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-07 15:32:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aofeng860308

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:33
在多克隆位点和EGFP之间，看看载体上是否有另一个启动子，如果有就一定是独立的共表达，如果没有，则可以进行融合表达。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
5楼2015-05-07 16:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
惊叹号: 金币+5 2015-05-07 17:13:40
看是一个ORF还是两个ORF。
赞一下 回复此楼
6楼2015-05-07 16:12:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

惊叹号

金虫 (正式写手)
我选择的载体MCS在EGFP前面，表达的是一个融合蛋白，现在的问题是融合蛋白的话，EGFP会不会影响目的基因的折叠？
赞一下 回复此楼
7楼2015-05-07 17:14:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wanglele87

金虫 (著名写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-05-07 23:01:18
没移码的话理论上就是一起表达了啊。不过有时候可能目的蛋白不好表达或者表达后不稳定，western只能看到egfp。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
一生不羁放纵爱自由
8楼2015-05-07 18:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 惊叹号 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 284求调剂 +8 天下熯 2026-02-28 8/400 2026-03-02 00:15 by 暮雨星晴
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +5 wsl111 2026-03-01 5/250 2026-03-01 23:45 by 暮雨星晴
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 12/600 2026-03-01 19:48 by 好好好1233
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 295求调剂 +7 19171856320 2026-02-28 7/350 2026-03-01 18:54 by 18137688336
[考研] 285求调剂 +8 满头大汗的学生 2026-02-28 8/400 2026-03-01 16:47 by caszguilin
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 302材料工程求调剂 +4 Doleres 2026-03-01 5/250 2026-03-01 11:52 by liqiongjy
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭