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mofashishe铜虫 (小有名气)
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蛋白相互作用问题 已有1人参与
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最近投稿一文章，陈述的是病原物的A蛋白与寄主的B蛋白相互作用的，在文中我提供了酵母双杂交、BiFC（还有共定位）和免疫共沉淀的数据都表明了这两个蛋白是可以相互作用的，但是评委一定要我补充promoter：GUS的数据证明寄主的B蛋白在病原物的侵染位点表达量提高。 我认为如果这个寄主的B蛋白是一类组织特异性表达蛋白的话则需要提供promoter：GUS的数据，但是文中我已经通过qPCR和WB证明了这个B蛋白是一类组成型蛋白，在所有组织中都有表达的，而且，也引用其他参考文献证明该蛋白是在所有组织中表达的。 我想问问我想问问promoter：gus的数据在证明两个蛋白之间的相互作用有什么意义的，病原物的蛋白与寄主的蛋白互作一定会提高该互作蛋白的表达的吗？有谁遇见过这种问题，怎么破啊？ |
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8楼2015-04-24 17:59:45
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3楼2015-04-24 16:58:20
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mofashishe: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-24 17:40:51
mofashishe: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-04-24 17:40:51
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我觉的review的重点是通过相互作用引起B在特定作用位点表达上升，表明B的富集参与生物胁迫，而不是单纯要再证明是否有相互作用发生，这是着眼于相互作用可能带来的生理意义。你用三种方法做相互作用已经很全面了。你的qPCR和WB只是证明B的整体水平上升，无法说明B是否高表达在AB作用部位。 至于AB相互作用是否引起B表达上升，这得看你的结果。同时，你应该意识到的是，AB相互作用可能不直接引起B表达上升，但会让B通过转运系统集中在AB作用的细胞位点。 |
4楼2015-04-24 17:36:54
