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汕头大学海洋科学接受调剂
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

[求助] 关于细菌密度的测定 已有4人参与

最近在做抗菌相关的实验,筛药或者其他实验之前首先要确定一下细菌密度的多少,这个确定方法一直不太明确,有文献里边说是用分光光度计测吸收值,比方说OD600=0.6时,细菌量是10的8次方,不同的文献定量方法不同,想知道这个是怎么确定的,需要标准曲线吗?
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lomis

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
OD可以代表菌的量的,你可以设梯度OD+梯度抗菌物质浓度。
没有命运,只有选择!
2楼2015-04-07 10:22:35
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-04-07 10:22:35
OD可以代表菌的量的,你可以设梯度OD+梯度抗菌物质浓度。

OD值代表菌量是怎么确定的,是统一确定的吗?
3楼2015-04-07 11:27:14
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jhyswqs: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:13:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by jhyswqs at 2015-04-07 11:27:14
OD值代表菌量是怎么确定的,是统一确定的吗?...

有公式进行换算的,菌体浓度。

[ 发自小木虫客户端 ]
追求不惜,奋斗不息
4楼2015-04-07 11:54:04
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王贤卓

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jhyswqs: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:12:34
OD值跟培养基成分,菌的特性,条件都有关系,不能简单看文献的数据的。想用OD值代替生物量,需要做标准曲线。
5楼2015-04-07 11:54:47
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 199006287956 at 2015-04-07 11:54:04
有公式进行换算的,菌体浓度。
...

请问是怎么换算的?谢谢
6楼2015-04-07 12:18:48
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 王贤卓 at 2015-04-07 11:54:47
OD值跟培养基成分,菌的特性,条件都有关系,不能简单看文献的数据的。想用OD值代替生物量,需要做标准曲线。

标准曲线是怎么做的呢?我想了解一下具体步骤,谢谢
7楼2015-04-07 12:19:45
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jhyswqs: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:12:23
用不同浓度的菌液测OD值,以菌个数为y,以OD为x,就可以做标准曲线了。要想知道菌的具体个数就用血球计数板数一下,这个简单方便。
8楼2015-04-07 12:57:15
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quiller2000

木虫 (著名写手)

1 如果你是做抗菌,最好老老实实用cfu来评价,可以先建立OD值与cfu的关系,然后计算
2 关于OD值,是不是用OD600和你的培养基与菌有关系,首先应该采用你的分析体系做一个光谱扫描选择合适的评价波长,如果OD600,OD700.. ...然后,建立标准曲线,因为这个时候你很难确定细胞数目,所以就将菌液梯度稀释,然后测OD值,确定你的线性范围。只有在线性范围内的值才是可靠的,才符合Lambert-Beer定律。

3 你还可以采用细菌计数板来进行快速计数。
致良知
9楼2015-04-08 09:57:35
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wyuejie

木虫 (初入文坛)

我是研究微藻的,一般我们的做法是采用血球计数板数出来不同OD值下的藻细胞个数,然后作标曲,每次测定藻液的OD值拟合出藻细胞数
让学术散发光芒
10楼2015-04-08 10:49:38
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