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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 关于细菌密度的测定
汕头大学海洋科学接受调剂
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jhyswqs

木虫 (正式写手)

[求助] 关于细菌密度的测定 已有4人参与

最近在做抗菌相关的实验，筛药或者其他实验之前首先要确定一下细菌密度的多少，这个确定方法一直不太明确，有文献里边说是用分光光度计测吸收值，比方说OD600=0.6时，细菌量是10的8次方，不同的文献定量方法不同，想知道这个是怎么确定的，需要标准曲线吗？
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1楼 2015-04-07 10:09:21
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lomis

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
OD可以代表菌的量的，你可以设梯度OD+梯度抗菌物质浓度。
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没有命运，只有选择！
2楼2015-04-07 10:22:35
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jhyswqs

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lomis at 2015-04-07 10:22:35
OD可以代表菌的量的，你可以设梯度OD+梯度抗菌物质浓度。

OD值代表菌量是怎么确定的，是统一确定的吗？
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3楼2015-04-07 11:27:14
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199006287956

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jhyswqs: 金币+4, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:13:02
引用回帖:
3楼: Originally posted by jhyswqs at 2015-04-07 11:27:14
OD值代表菌量是怎么确定的，是统一确定的吗？...

有公式进行换算的，菌体浓度。

[ 发自小木虫客户端 ]
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追求不惜，奋斗不息
4楼2015-04-07 11:54:04
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王贤卓

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jhyswqs: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:12:34
OD值跟培养基成分，菌的特性，条件都有关系，不能简单看文献的数据的。想用OD值代替生物量，需要做标准曲线。
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5楼2015-04-07 11:54:47
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jhyswqs

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 199006287956 at 2015-04-07 11:54:04
有公式进行换算的，菌体浓度。
...

请问是怎么换算的？谢谢
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6楼2015-04-07 12:18:48
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jhyswqs

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王贤卓 at 2015-04-07 11:54:47
OD值跟培养基成分，菌的特性，条件都有关系，不能简单看文献的数据的。想用OD值代替生物量，需要做标准曲线。

标准曲线是怎么做的呢？我想了解一下具体步骤，谢谢
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7楼2015-04-07 12:19:45
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一个不小心就

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jhyswqs: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-04-07 20:12:23
用不同浓度的菌液测OD值，以菌个数为y，以OD为x，就可以做标准曲线了。要想知道菌的具体个数就用血球计数板数一下，这个简单方便。
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8楼2015-04-07 12:57:15
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quiller2000

木虫 (著名写手)
1 如果你是做抗菌，最好老老实实用cfu来评价，可以先建立OD值与cfu的关系，然后计算
2 关于OD值，是不是用OD600和你的培养基与菌有关系，首先应该采用你的分析体系做一个光谱扫描选择合适的评价波长，如果OD600,OD700.. ...然后，建立标准曲线，因为这个时候你很难确定细胞数目，所以就将菌液梯度稀释，然后测OD值，确定你的线性范围。只有在线性范围内的值才是可靠的，才符合Lambert-Beer定律。

3 你还可以采用细菌计数板来进行快速计数。
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致良知
9楼2015-04-08 09:57:35
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wyuejie

木虫 (初入文坛)
我是研究微藻的，一般我们的做法是采用血球计数板数出来不同OD值下的藻细胞个数，然后作标曲，每次测定藻液的OD值拟合出藻细胞数
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让学术散发光芒
10楼2015-04-08 10:49:38
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