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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 提细菌基因组的试剂盒可以把细菌中的质粒也一同提出来吗？
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吉林农大

木虫 (小有名气)

[求助] 提细菌基因组的试剂盒可以把细菌中的质粒也一同提出来吗？ 已有4人参与

各位虫友好：
      我最近想要表达某种细菌的抗原蛋白，其表达基因位于细菌胞体内的一个大型质粒上，我这里有细菌基因组提取试剂盒。
      我想请问用这个细菌基因组试剂盒可以在提该细菌基因组的同时也把细菌胞体内的大型质粒提取出来吗？然后可以用这全基因组PCR，扩增我想要的质粒上的那个目的片段吗？


      我给试剂盒公司打过咨询电话，碰到个不甚略懂的技术员，没有回答我，所以只能求助大家，哪个大神帮忙确定的解答一下，小弟不胜感激！
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我靠
1楼 2015-03-26 12:28:45
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candy1219

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

为啥不直接提质粒呢？
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兽医微生物的苦逼女博士
2楼2015-04-01 10:17:52
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吉林农大

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by candy1219 at 2015-04-01 10:17:52
为啥不直接提质粒呢？

您好，你是说直接用我常用的质粒小提试剂盒就可以了吗
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我靠
3楼2015-04-01 15:51:50
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halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

建议你买质粒提取试剂盒，貌似也不贵吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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现在我们能做的就是努力努力再努力
4楼2015-04-01 18:28:14
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candy1219

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by candy1219 at 2015-04-01 10:17:52
为啥不直接提质粒呢？

因为质粒是环状的和细菌基因组DNA不同，提质粒的试剂盒好像原理就是利用这个把质粒提出来。所以我觉着用平常提质粒的试剂盒就可以了。。。。不是大神，意见仅供参考。。。
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兽医微生物的苦逼女博士
5楼2015-04-01 19:32:46
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吉林农大

木虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by candy1219 at 2015-04-01 19:32:46
因为质粒是环状的和细菌基因组DNA不同，提质粒的试剂盒好像原理就是利用这个把质粒提出来。所以我觉着用平常提质粒的试剂盒就可以了。。。。不是大神，意见仅供参考。。。...

谢谢你的意见，质粒提取盒子我有，就是因子手头的菌种有些少，所以不敢冒然去做
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我靠
6楼2015-04-02 00:45:05
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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般来说，提取基因组和质粒的试剂有所不同，这是两者的结构差异引起的，基因组的结构很复杂，什么一级结构二级结构三级结构四级结构，需要完全打开才能提出来，而质粒恰好运用基因组复杂结构的特点，采用碱变性法直接提出来，其实，我们提取质粒的时候，也会有基因组的污染。所以，你为何不自己配溶液提取质粒呢，很简单的。
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7楼2015-04-04 02:07:56
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吉林农大

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by hkj710 at 2015-04-04 02:07:56
一般来说，提取基因组和质粒的试剂有所不同，这是两者的结构差异引起的，基因组的结构很复杂，什么一级结构二级结构三级结构四级结构，需要完全打开才能提出来，而质粒恰好运用基因组复杂结构的特点，采用碱变性法直 ...

请问，按你的意思，我用现成的小型质粒提取试剂盒也是可以的，是吗
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我靠
8楼2015-04-04 09:11:33
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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

当然，为什么不可以呢。
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9楼2015-04-05 06:30:11
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ldyt1123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我觉得应该确定你的质粒大小，另外小型质粒提取试剂盒针对的是大肠杆菌，不知道你的是不是大肠杆菌。建议手提，类似于提基因组DNA，不加PK。
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10楼2015-12-27 19:39:58
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