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tommylike

铜虫 (小有名气)

[求助] 基因家族研究 已有2人参与

小弟新手,刚刚接触生物信息。目前在做激素合成通路的基因家族研究。
公司给了我一些挑选出的相关基因序列(我们这个物种的基因组正在测,还没发布,所以是公司找的),我用blastp和blastn对这些序列进行重新筛选。大多数是从ATG开始的。
(1)请问这些序列在进行设计引物前,都需要进行哪些分析呢?多重比对?保守区域?ORF?
(2)在设计引物时候,如何找基因序列的保守区域?请大神详细说一下,我用clustal找,就是看到好多地方标了*,但是这样的区域有很多gap,什么样的区域才可以用来设计引物呢?
(3)另外,家族内部的不同‘亚基因’间在设计引物时,是不是要选择不同的保守区,避开之间相似的保守区域呢?要是设计在同一个保守区域,会不会出现扩增时候,扩出来多个基因的情况啊?
请大家帮忙啦,我实在是自己琢磨不明白。
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tommylike

铜虫 (小有名气)

是不是在筛选出的一条基因,然后根据blast到的相似基因,进行系统发育分析,然后对这些数据进行多重比对,找保守结构?
还是说拿我找出的这个基因家族的所有基因,进行多重比对?有点蒙……
2楼2015-03-26 09:48:28
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普通回帖

tommylike

铜虫 (小有名气)

虽然没人回答,自己都搞清楚了
3楼2015-04-01 17:22:27
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白曼巴style

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tommylike at 2015-03-26 09:48:28
是不是在筛选出的一条基因,然后根据blast到的相似基因,进行系统发育分析,然后对这些数据进行多重比对,找保守结构?
还是说拿我找出的这个基因家族的所有基因,进行多重比对?有点蒙……

我的课题是找出一个基因家族的所有基因,进行多重比对,不知道怎么找保守序列,求解。。。
4楼2015-04-04 10:58:15
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白曼巴style

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我的课题是找出一个酶的一个家族的所有基因,进行多重比对,不知道怎么找保守序列,求解。。。
5楼2015-04-04 11:02:32
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tommylike

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 白曼巴style at 2015-04-04 11:02:32
我的课题是找出一个酶的一个家族的所有基因,进行多重比对,不知道怎么找保守序列,求解。。。

clustal多重比对的时候,会有*的标记,大片标记的区域就是保守的。我只能帮你到这里了。
6楼2015-04-13 10:31:01
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混合配搭

新虫 (小有名气)

你好,你是怎么找到家族的啊,我刚接触不太明白,基因家族的大小怎么判断啊?多重比对的目的是什么啊?
7楼2015-04-15 08:11:18
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tommylike

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 混合配搭 at 2015-04-15 08:11:18
你好,你是怎么找到家族的啊,我刚接触不太明白,基因家族的大小怎么判断啊?多重比对的目的是什么啊?

哦,我在ncbi里面搜索相关的基因名称,一个物种里面会有很多关于这个基因家族的序列,每一条都下载。序列挑nm开头的比较好。多重比对就是看这些序列的差异,有哪些相似的地方。
8楼2015-04-15 19:45:38
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混合配搭

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by tommylike at 2015-04-15 19:45:38
哦,我在ncbi里面搜索相关的基因名称,一个物种里面会有很多关于这个基因家族的序列,每一条都下载。序列挑nm开头的比较好。多重比对就是看这些序列的差异,有哪些相似的地方。...

nm开头的是怎么回事啊?如果只有一段序列,怎么查一个家族呢?

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2015-04-15 22:38:13
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tommylike

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 混合配搭 at 2015-04-15 22:38:13
nm开头的是怎么回事啊?如果只有一段序列,怎么查一个家族呢?
...

那你blast下,看看你的序列是什么基因,然后在搜索吧。NM的就是accession号的开头字母
10楼2015-04-16 11:05:37
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