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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 高效液相色谱图问题。肩峰？杂质？
汕头大学海洋科学接受调剂
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赵晓宁8

银虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱图问题。肩峰？杂质？ 已有4人参与

最近刚做高效液相，流动相甲醇：水=75:25，流速1ml/min,出峰不理想，浓度为20ug/ml时峰貌似有点前延，浓度为100ug/ml时出现了肩峰，大家帮忙分析下到底是什么原因？

高效液相色谱图问题。肩峰？杂质？
IMAG1448[1].jpg


高效液相色谱图问题。肩峰？杂质？-1
IMAG1450[1].jpg
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1楼 2015-03-21 16:02:18
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pipwang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
样品用什么溶解的？
峰前伸可能是溶解样品的溶剂极性低于流动相
另外考虑下是不是色谱柱出问题了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2015-03-21 21:20:44
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查看全部 8 个回答

紫薯培根

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一张明显是柱子鼓了，浓度大了，峰就会出现平头现象，若是有关物质，影响不是太大！

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-03-21 19:12:04
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赵晓宁8

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pipwang at 2015-03-21 21:20:44
样品用什么溶解的？
峰前伸可能是溶解样品的溶剂极性低于流动相
另外考虑下是不是色谱柱出问题了

加少量冰醋酸溶解，甲醇定容的。柱子是新的应该没什么问题。我这个样品放的时间挺长了，我想这会不会是样品发生变化了
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4楼2015-03-22 08:39:22
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张鑫1982

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
赵晓宁8: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-03-26 08:33:13
1.如果这个色谱条件是药典（各国）方法，那就是色谱柱的问题。
2.如果色谱条件是文献或者自己摸索的，要先确定色谱柱有没有问题。
3.色谱柱的选择性千差万别，某个特定品种，waters的色谱柱不一定就比依利特的好。
4.如果换了色谱柱还这样，那就必须重新摸索色谱条件。
5.这种情况，我的第一反应就是在这个流动相系统中，色谱柱对待测物质的选择性非常差；其次，可能色谱柱的柱效下降到了一定地步，需要更换色谱柱。
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如果今天和昨天一样，那么明天又有什么意义？
5楼2015-03-22 09:56:11
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