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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 金黄色葡萄球菌DNA的荧光PCR的ct值大于40的原因
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暖阳ny2

新虫 (初入文坛)

[求助] 金黄色葡萄球菌DNA的荧光PCR的ct值大于40的原因

采用煮沸法提取的金黄色葡萄球菌DNA，常规PCR可见明显的目的条带，荧光pcr的ct值大于40
金黄色葡萄球菌F        TTCTTCACGACTAQATAQACGCTCA
金黄色葡萄球菌R        GGTACTACTAQAGATTATCAAGACGGCT
金黄色葡萄球菌P        CAGAACACAATGTTTCCGATGCAACGT
反应体系为20μL反应体系：Premix Ex Taq(Probe qPCR)2× ，10μL， 引物对各0.4μL(10uM)，探针0.8μL，DNA模板2μL，灭菌蒸馏水6.4μL，
反应条件：预变性95℃ 30s，95℃ 变性5s，60℃退火延伸 40s， 同时收集FAM荧光，40个循环。
求各位大神解答！！！
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1楼 2015-03-13 21:17:23
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