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金黄色葡萄球菌DNA的荧光PCR的ct值大于40的原因
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采用煮沸法提取的金黄色葡萄球菌DNA，常规PCR可见明显的目的条带，荧光pcr的ct值大于40 金黄色葡萄球菌F TTCTTCACGACTAQATAQACGCTCA 金黄色葡萄球菌R GGTACTACTAQAGATTATCAAGACGGCT 金黄色葡萄球菌P CAGAACACAATGTTTCCGATGCAACGT 反应体系为20μL反应体系：Premix Ex Taq(Probe qPCR)2× ，10μL， 引物对各0.4μL(10uM)，探针0.8μL，DNA模板2μL，灭菌蒸馏水6.4μL， 反应条件：预变性95℃ 30s，95℃ 变性5s，60℃退火延伸 40s， 同时收集FAM荧光，40个循环。 求各位大神解答！！！ |
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