应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 转pKD46时转不进去
121/2返回列表12下一页
查看: 3045  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

浅语8905

新虫 (小有名气)

[求助] 转pKD46时转不进去 已有4人参与

转pKD46时，氯化钙和电转法都试过了，可是还是没有转进去，不知道原因？感受态转别的质粒倒是没有问题，pKD46也可以转入别的菌中！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-01-29 14:56:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

张凡云

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2015-02-02 10:55:19
你是用Red系统做敲除吧，要看你用的菌是什么菌，我也在做这个，目前做到了用pcp20消除FRT位点了，可以一起讨论一下。
赞一下(3人) 回复此楼
4楼2015-01-31 02:23:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

maila
2楼2015-01-30 08:21:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)
3楼2015-01-30 11:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 张凡云 at 2015-01-31 02:23:39
你是用Red系统做敲除吧，要看你用的菌是什么菌，我也在做这个，目前做到了用pcp20消除FRT位点了，可以一起讨论一下。

我是转进去PKD46了，但是现在是长一段时间，菌就死了，不知道怎么解决呢，只能先不断活化了
赞一下 回复此楼
5楼2015-02-01 20:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

twinacmilan

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
浅语8905: 金币+1, ★有帮助 2015-02-03 08:45:57
转进去pKD46注意保证培养温度低于30度，因为质粒是温敏型，高温容易造成质粒丢失
赞一下 回复此楼
6楼2015-02-02 21:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by twinacmilan at 2015-02-02 21:17:36
转进去pKD46注意保证培养温度低于30度，因为质粒是温敏型，高温容易造成质粒丢失

这些都是按照步骤来的，应该是菌株自身的问题，转PKD46时自己提取的质粒怎么都转不进去，买了的产品才转进去，就觉得好奇怪
赞一下 回复此楼
7楼2015-02-03 08:44:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

twinacmilan

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 浅语8905 at 2015-02-03 08:44:57
这些都是按照步骤来的，应该是菌株自身的问题，转PKD46时自己提取的质粒怎么都转不进去，买了的产品才转进去，就觉得好奇怪...

和买不买的质粒没啥关系吧，估计你手提的质粒已经不是pkd46了
赞一下 回复此楼
8楼2015-02-04 15:46:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

浅语8905

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by twinacmilan at 2015-02-04 15:46:02
和买不买的质粒没啥关系吧，估计你手提的质粒已经不是pkd46了...

应该不是这个问题，就是买回来的质导入DH5a中，在提取出来的质粒转入我的菌中，就是转不进去，也是酶切验证过的，质粒是对的
赞一下 回复此楼
9楼2015-02-04 16:16:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一砖头飘死

银虫 (小有名气)
陈娟，不是已经敲掉了嘛！

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2015-02-07 17:15:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 浅语8905 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 7/350 2026-09-03 13:20 by T0rGB46095mJ
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 13:20 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +10 雨打竹帘 2026-08-30 14/700 2026-09-03 13:17 by qsd10086
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:05 by T0rGB46095mJ
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 4/200 2026-09-03 03:14 by rM1TE0WVDIIY
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 6/300 2026-09-02 23:59 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗？ +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭