24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3184  |  回复: 25

476210038

新虫 (初入文坛)

[求助] 液相色谱高浓度时为单峰,低浓度时出现两个峰 已有10人参与

液相色谱高浓度时为单峰,低浓度时出现两个峰,且两个峰没有达到基线分离,怎么办? 试了中间浓度,峰形为一个大峰的右翼上出现一个小峰。怎么办呢,新手求助。
等度洗脱水(0.05%甲酸):乙腈=35:65,样品用乙腈溶的,样品易溶于有机相,水中溶解性差
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

谈判陶

荣誉版主 (文坛精英)

如切如磋,如琢如磨

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 感谢交流,欢迎常来分析版 2015-01-31 08:33:03
说明至少为两个峰
高浓度时重合一起了

[ 发自小木虫客户端 ]
挑灯看人间!
2楼2015-01-28 21:46:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+3, 感谢参与。 2015-01-29 12:06:37
引用回帖:
3楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-28 01:50:58
样品刚买不久 纯度应该没有问题

你的样品有酸/碱基团吗?你用的FA量很小,难以控制pH一般应该在水和有机相里都加0.1%FA。还有溶样应该尽量用初始流动相。

新买的样品和纯度没有关系,甚至新买的可能更差,因为以前没人证明过它是纯的。打个核磁验证一下比较好。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2015-01-28 22:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w9412

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-28 23:49:51
刚刚连了质谱做了全扫描,发现两个峰所处的时间段质谱显示为同一分子量的物质,怀疑是不是同分异构体?浓度低时的两个没分开的峰,质谱上显示在两者的交叉处,就是峰谷处,质谱响应是最高的,而两侧相对低一些...

如果你不是用的手性柱的话一般不会把同分异构体分离开的
液相,分析纯化,多肽蛋白
24楼2015-02-02 12:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songzi136

金虫 (正式写手)

用你的流动相溶一下试试
25楼2015-02-02 13:08:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

476210038

新虫 (初入文坛)

样品刚买不久 纯度应该没有问题
3楼2015-01-28 21:50:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

476210038

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by superyeast at 2015-01-28 22:27:22
你的样品有酸/碱基团吗?你用的FA量很小,难以控制pH一般应该在水和有机相里都加0.1%FA。还有溶样应该尽量用初始流动相。

新买的样品和纯度没有关系,甚至新买的可能更差,因为以前没人证明过它是纯的。打个核磁 ...

刚刚连了质谱做了全扫描,发现两个峰所处的时间段质谱显示为同一分子量的物质,怀疑是不是同分异构体?浓度低时的两个没分开的峰,质谱上显示在两者的交叉处,就是峰谷处,质谱响应是最高的,而两侧相对低一些
5楼2015-01-28 23:49:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

476210038

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 476210038 at 2015-01-28 23:49:51
刚刚连了质谱做了全扫描,发现两个峰所处的时间段质谱显示为同一分子量的物质,怀疑是不是同分异构体?浓度低时的两个没分开的峰,质谱上显示在两者的交叉处,就是峰谷处,质谱响应是最高的,而两侧相对低一些...

还有就是,低浓度样品我改变洗脱条件后(水:乙腈=40:60),低浓度的峰也二合一了,就是峰形感觉不是十分对称,另外溶剂峰峰高和样品峰峰高差不多,不知道这样的液相条件能用吗
6楼2015-01-28 23:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longyi706565

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+3, 感谢参与。 2015-01-29 12:06:31
信息太少。最好给张图,方便给个结构看看。
这种情况可能性较多,其中有一种可能你的pH选择不对或者溶剂效应啥的,其实就是一个物质。
7楼2015-01-29 10:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ndchem

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+3, 感谢参与。 2015-01-29 12:06:26
476210038: 金币+2, 有帮助 2015-02-02 09:50:32
再强调一次,hplc不是出1个峰就是纯物质,不是出两个峰就不是纯物质,99%的东西出20个峰都见过,hplc只能用做参比,不能定性

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2015-01-29 10:57:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秀古书生

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+3, 感谢参与。 2015-01-29 12:06:13
最好把你的谱图传上来让大家分析一下,同一个描述图谱很多情况不一定相同,确定下到底是物质本身的原因还是条件的原因,还是图谱的原因。
9楼2015-01-29 11:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫儿飞飞呦

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
上图比较直观,是不是同分异构或结构相近的物质没有完全分离,试一下其他的浓度流动相洗脱

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2015-01-29 12:57:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 476210038 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +7 随心所欲☆ 2026-04-15 8/400 2026-04-21 08:22 by Equinoxhua
[考研] 295分求调剂 +6 ?要上岸? 2026-04-17 6/300 2026-04-21 08:18 by Equinoxhua
[考博] 申博/考博 +4 啃面包的小书虫 2026-04-17 5/250 2026-04-20 10:47 by YuY66
[考研] 求计算机方向调剂 +3 Toffee2 2026-04-16 6/300 2026-04-19 22:37 by ll叶
[考研] 294求调剂 +8 淡然654321 2026-04-17 9/450 2026-04-19 19:51 by Equinoxhua
[考研] 304求调剂 +8 castLight 2026-04-16 8/400 2026-04-19 17:14 by 中豫男
[考研] 求调剂推荐 +9 小聂爱学习 2026-04-14 9/450 2026-04-19 17:03 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[考研] 291求调剂 +12 关忆北. 2026-04-14 13/650 2026-04-19 16:50 by 中豫男
[考研] 求调剂 +6 苦命人。。。 2026-04-18 7/350 2026-04-19 16:27 by 中豫男
[考研] 307中医考研调剂 +9 于以采蘩 2026-04-14 9/450 2026-04-19 08:41 by 烟雨流涯
[考研] 294求调剂 +15 淡然654321 2026-04-15 15/750 2026-04-19 08:20 by cuisz
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 一志愿华中农业071010,320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[有机交流] 二苯甲酮酸类衍生物 50+3 小白爱主人 2026-04-17 6/300 2026-04-17 18:47 by kf2781974
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +9 刘墨墨 2026-04-15 9/450 2026-04-16 17:14 by 崔崔崔cccc
信息提示
请填处理意见