24小时热门版块排行榜    

查看: 716  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

msw0103

金虫 (正式写手)

[求助] 说我遇到了罕见事件,大家帮我分析分析 已有2人参与

我克隆一个片段连接到pMD-20T载体,用通用引物测序,结果正确。然后我双酶切这个片段连入到表达载体上,用表达载体上的测序引物进行测序,结果也正确,峰图很干净。再之后我用我扩增该片的引物进行测序,竟然在序列中部有连续7个碱基出现双峰,也就是所谓的疑似突变。测序片段仅400bp,为什么会这样呢?测序公司说我遇到了罕见事件,菌发生了突变,让我重新纯化送测序。我如果不进行第三次测序,我就不可能发现这个问题,那我就当成正确的往下做了。我很疑惑!大家有遇到过这样的问题吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

msw0103

金虫 (正式写手)

都没有人遇到过吗?难道真是小概率事件被我撞见?
4楼2015-01-26 13:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是会是你引物扩增时出现的突变?
2楼2015-01-26 13:29:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

msw0103

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-26 13:29:31
是不是会是你引物扩增时出现的突变?

我引物扩增的片段克隆岛pMD-20T载体,测序是正确的呀?而且用的高保真酶,扩这么短的片段。
3楼2015-01-26 13:41:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是测序的菌保存不当吧,实验室可以让菌突变的东西太多了。
永远相信未知的总是美好的!
5楼2015-01-26 17:21:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见