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说我遇到了罕见事件,大家帮我分析分析 已有2人参与
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| 我克隆一个片段连接到pMD-20T载体,用通用引物测序,结果正确。然后我双酶切这个片段连入到表达载体上,用表达载体上的测序引物进行测序,结果也正确,峰图很干净。再之后我用我扩增该片的引物进行测序,竟然在序列中部有连续7个碱基出现双峰,也就是所谓的疑似突变。测序片段仅400bp,为什么会这样呢?测序公司说我遇到了罕见事件,菌发生了突变,让我重新纯化送测序。我如果不进行第三次测序,我就不可能发现这个问题,那我就当成正确的往下做了。我很疑惑!大家有遇到过这样的问题吗? |
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