24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 4848  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

落木778

铜虫 (小有名气)

[求助] 构建携带HA标签的基因 已有2人参与

各位,请求帮助,我需要在基因的3'端构建携带HA标签,需要将终止密码子从目的基因序列后面转移到融合标签基因序列后面。
这样做的方法是什么? 谢谢!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落木778

铜虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-23 21:31:05
选好起始和终止,两外你的验证ha的表达

你好,因为还没有做过这类实验,实在有太多的疑问了,好希望有位大神来帮我细细解答。引物设计是不是需要与HA标签序列完全匹配才能扩增出来?引物末端还需要加终止密码子不?这样设计是不是引物过长,导致Tm值过高?大神帮帮忙吧!
5楼2015-01-23 22:43:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

hanxiaominhu

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
落木778(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-01-23 21:50:25
一般如果是HA标签在3‘端的质粒的话,它后面会自带终止密码子的不用另外加,在扩增自己基因的是候引物不带终止密码子就可以了,另外注意不要移码。
2楼2015-01-23 18:21:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

落木778

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2015-01-23 18:21:31
一般如果是HA标签在3‘端的质粒的话,它后面会自带终止密码子的不用另外加,在扩增自己基因的是候引物不带终止密码子就可以了,另外注意不要移码。

我打算设计携带HA-tag的引物,然后直接PCR扩增出目的基因-HA片段,这样的话就涉及终止密码子的问题了。谢谢!!!
3楼2015-01-23 21:26:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
选好起始和终止,两外你的验证ha的表达

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2015-01-23 21:31:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +7 JKSOIID 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:10 by 滴滴上岸呀
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +7 lllllos 2026-03-30 7/350 2026-03-30 20:06 by piklet
[考研] 一志愿:西北大学,英一数一408-284分求调剂 +5 12.27 2026-03-27 5/250 2026-03-30 19:31 by 源_2020
[考研] 材料学硕333求调剂 +14 北道巷 2026-03-24 14/700 2026-03-30 18:59 by 源_2020
[考研] 298求调剂 +3 什么是胖头鱼 2026-03-30 5/250 2026-03-30 14:41 by 青海小西牛
[考研] 277跪求调剂 +7 1915668 2026-03-27 11/550 2026-03-30 12:49 by fangnagu
[考研] 0703本科郑州大学求调剂 +7 nhj_ 2026-03-25 7/350 2026-03-30 12:44 by fangnagu
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +6 @taotao 2026-03-26 7/350 2026-03-30 10:43 by 我是小康
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 08工科求调剂286 +3 tgs_001 2026-03-28 3/150 2026-03-29 18:29 by 1018329917
[考研] 330分求调剂 +5 qzenlc 2026-03-29 5/250 2026-03-29 07:37 by 无际的草原
[考研] 学硕274求调剂 +9 Li李鱼 2026-03-26 9/450 2026-03-28 21:42 by bymhappy
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 调剂 +4 柚柚yoyo 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:43 by fmesaito
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
信息提示
请填处理意见