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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

[求助] 液相 C18柱子 我的流动相为甲醇和磷酸二氢钾,第一次使用柱子该怎么使用呢 已有3人参与

如题,第一次使用柱子时,是不是先用甲醇冲柱子20分钟,把里面的东西冲洗干净;再用磷酸二氢钾溶液平衡柱子20分钟(也就是跑基线上仪器平稳),最后上样。请问各位虫友,我这样理解对吗??那用完之后直接用甲醇冲柱子,让甲醇保存在柱子里,不需要用水冲了吧??本人刚接触液相,什么都不懂,望各位赐教,不甚感激!!
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titus0805

铁虫 (小有名气)

弦上的梦99: 回帖置顶 2015-01-20 14:23:22
写错,都是甲醇,没有甲醛
3楼2015-01-20 12:27:37
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titus0805

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
对的。洗柱子都是用甲醇。不过洗20分钟短了点吧,平衡时间也稍短,平衡是让两个泵同时进甲醛和磷酸二氢钾,调好比例。
最后清洗柱子也是甲醇洗,洗到没有峰,然后关机就行。

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2楼2015-01-20 12:27:11
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傻牛皮

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议甲醇和磷酸盐之间用纯水过渡一下,盐溶液很容易在有机相中析出,从而造成柱压升高,况且磷酸盐本身的溶解度都比较小。
5楼2015-01-20 20:13:01
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傻牛皮

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 弦上的梦99 at 2015-01-20 22:07:35
用纯水过渡一下是什么意思啊,是在哪一步需要用纯水过渡呢...

顺序是:开机,甲醇,水,磷酸盐溶液,水,甲醇,关机
10楼2015-01-20 22:38:51
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by titus0805 at 2015-01-20 12:27:11
对的。洗柱子都是用甲醇。不过洗20分钟短了点吧,平衡时间也稍短,平衡是让两个泵同时进甲醛和磷酸二氢钾,调好比例。
最后清洗柱子也是甲醇洗,洗到没有峰,然后关机就行。

3Q!!!!有问题还找你,嘿嘿!
4楼2015-01-20 14:24:37
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 傻牛皮 at 2015-01-20 20:13:01
建议甲醇和磷酸盐之间用纯水过渡一下,盐溶液很容易在有机相中析出,从而造成柱压升高,况且磷酸盐本身的溶解度都比较小。

用纯水过渡一下是什么意思啊,是在哪一步需要用纯水过渡呢
6楼2015-01-20 22:07:35
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by titus0805 at 2015-01-20 12:27:11
对的。洗柱子都是用甲醇。不过洗20分钟短了点吧,平衡时间也稍短,平衡是让两个泵同时进甲醛和磷酸二氢钾,调好比例。
最后清洗柱子也是甲醇洗,洗到没有峰,然后关机就行。

对了,洗柱子用的甲醇是纯的甲醇么?还是?
7楼2015-01-20 22:08:35
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by titus0805 at 2015-01-20 12:27:11
对的。洗柱子都是用甲醇。不过洗20分钟短了点吧,平衡时间也稍短,平衡是让两个泵同时进甲醛和磷酸二氢钾,调好比例。
最后清洗柱子也是甲醇洗,洗到没有峰,然后关机就行。

还问一个问题,HPLC grade的磷酸二氢钾用已经过滤的水配制的10mM流动相,还需要过滤一次么?谢谢啦,嘿嘿
8楼2015-01-20 22:28:36
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傻牛皮

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 弦上的梦99 at 2015-01-20 22:28:36
还问一个问题,HPLC grade的磷酸二氢钾用已经过滤的水配制的10mM流动相,还需要过滤一次么?谢谢啦,嘿嘿...

一般配好后再过滤,去气泡
9楼2015-01-20 22:37:17
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