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沐浴澄

新虫 (初入文坛)

[求助] 急急!为什么用磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠做流动相特别毁色谱柱??

我在做生物碱类(莨菪烷类)的成分分析,采用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(内含0.0025mol/L庚烷磺酸钠)-乙腈,梯度作为流动相,柱子在一周后就不行了,之后怀疑是有盐析出,所以用大比例水冲洗,之后还是不行!但听说有人也用同样的流动相做,没有出现这个问题,特此求救!!!我用的是安捷伦1260机器,安捷伦plus柱,希望各界朋友多多指教,很急啊!谢谢了
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dragonshxmc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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我们也用过磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠做流动相,但没有你这种现象.我感觉是否你的样品在柱子上吸附了啊.还有你流动相的pH是否容易引起样品沉淀或对柱子损害,超过了柱子的耐受pH
新药,研发,注册,质量
2楼2013-08-15 17:30:59
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splendid1028

金虫 (小有名气)

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有些柱子是不能直接用水冲的,容易把柱子冲塌了。
3楼2013-08-15 19:26:34
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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为什么你的流动相缓冲盐弄得这么复杂呢,用了离子对试剂,还用磷酸二氢钾干啥?离子对试剂是挺伤柱子的,用后好好冲,应该是没啥问题的;不过有一点需注意,用过离子对试剂的色谱柱,最好就固定只做这一个品种,不要用其它缓冲盐体系,因为使用过离子对缓冲盐体系的色谱柱填料已经发生某种改变,如果再用其它流动相体系,可能会有问题或者用完其它流动相体系之后,再用离子对体系又会发生变化,因此切忌只要用了离子对试剂之后的色谱柱就基本上专用了。
gwmgyp
4楼2013-08-16 08:16:40
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yqs1127

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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庚烷磺酸钠就是比较费柱子的,这东西一般质量还不太好,杂质挺多,还容易产生气泡

尽量买质量好的hplc级的;有必要的话过滤两遍,每一遍都换个新膜;做这个的期间柱子尽量别换其他流动相干别的;用完的时候用10%—30%的甲醇水多冲一会,一小时以上
5楼2013-08-16 11:02:29
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yurong1000

至尊木虫 (著名写手)

小木虫巡视大臣

【答案】应助回帖

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磺酸盐与钾盐中的钾离子能生成沉淀,即难溶于水溶液中。比如SDS和钾盐的溶液会生成难溶于水的十二烷基硫酸钾,这个东西会堵塞色谱柱,所以在用SDS时,不能用钾盐而要用钠盐,你即便加热把生成的十二烷基硫酸钾溶解掉了,但还是会析出的
6楼2013-08-16 16:12:08
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