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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 急急！为什么用磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠做流动相特别毁色谱柱？？
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沐浴澄

新虫 (初入文坛)

[求助] 急急！为什么用磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠做流动相特别毁色谱柱？？

我在做生物碱类（莨菪烷类）的成分分析，采用0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（内含0.0025mol/L庚烷磺酸钠）-乙腈，梯度作为流动相，柱子在一周后就不行了，之后怀疑是有盐析出，所以用大比例水冲洗，之后还是不行！但听说有人也用同样的流动相做，没有出现这个问题，特此求救！！！我用的是安捷伦1260机器，安捷伦plus柱，希望各界朋友多多指教，很急啊！谢谢了
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1楼 2013-08-15 13:11:48
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dragonshxmc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们也用过磷酸二氢钾和庚烷磺酸钠做流动相,但没有你这种现象.我感觉是否你的样品在柱子上吸附了啊.还有你流动相的pH是否容易引起样品沉淀或对柱子损害,超过了柱子的耐受pH
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新药,研发,注册,质量
2楼2013-08-15 17:30:59
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splendid1028

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有些柱子是不能直接用水冲的，容易把柱子冲塌了。
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3楼2013-08-15 19:26:34
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gwmgyp

版主 (知名作家)

搬砖将

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
为什么你的流动相缓冲盐弄得这么复杂呢，用了离子对试剂，还用磷酸二氢钾干啥？离子对试剂是挺伤柱子的，用后好好冲，应该是没啥问题的；不过有一点需注意，用过离子对试剂的色谱柱，最好就固定只做这一个品种，不要用其它缓冲盐体系，因为使用过离子对缓冲盐体系的色谱柱填料已经发生某种改变，如果再用其它流动相体系，可能会有问题或者用完其它流动相体系之后，再用离子对体系又会发生变化，因此切忌只要用了离子对试剂之后的色谱柱就基本上专用了。
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gwmgyp
4楼2013-08-16 08:16:40
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yqs1127

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
庚烷磺酸钠就是比较费柱子的，这东西一般质量还不太好，杂质挺多，还容易产生气泡

尽量买质量好的hplc级的；有必要的话过滤两遍，每一遍都换个新膜；做这个的期间柱子尽量别换其他流动相干别的；用完的时候用10%—30%的甲醇水多冲一会，一小时以上
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5楼2013-08-16 11:02:29
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yurong1000

至尊木虫 (著名写手)

小木虫巡视大臣

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
磺酸盐与钾盐中的钾离子能生成沉淀，即难溶于水溶液中。比如SDS和钾盐的溶液会生成难溶于水的十二烷基硫酸钾，这个东西会堵塞色谱柱，所以在用SDS时，不能用钾盐而要用钠盐，你即便加热把生成的十二烷基硫酸钾溶解掉了，但还是会析出的
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6楼2013-08-16 16:12:08
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